2020基因工程的操作工具.pptVIP

? 什么叫基因工程？ 基因工程又叫 基因拼接技术 或 DNA 重组技术 。 该技术是在 生物体外 ，通过对 DNA 分子进行 人工“ 剪切 ”和“ 拼接 ”，对生物的基因进 行 改造 和 重新组合 ，然后 导入受体细胞 内进 行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内 表达 ， 产生出人类所需要的 基因产物 。 基因工程的概念 基因工程 的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或 DNA 重组技术 生物体外 基因 DNA 分子水平 定向改造生物的遗传性状 获得人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 问题探讨： 转基因的的抗虫棉 苏云金杆菌含有一种可 以合成毒蛋白的基因。 让细菌的毒蛋白基因在 棉花细胞中表达，可培育出 抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 苏云金杆菌 毒蛋白 普通棉花 抗虫棉 综合应用：简述基因工程培育抗虫棉的过程 普通棉花 ( 无抗虫特性 ) 苏云金杆菌 提取 抗虫基因 与 运载体 连接 导入 棉花细胞 ( 含 抗虫基因 ) 棉花植株 ( 有 抗虫特性 ) 表达 检测 思考： 1. 转基因技术实现了一种生物的某些性状在另一种 生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的 什么过程有关？ 2. 基因工程培育抗虫棉 需要做哪些关键工作？ DNA( 基因 ) mRNA 蛋白质 ( 性状 ) 体现出密码子在生物界是通用的！ 转录 翻译 ? 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗 虫基因从苏云金芽孢杆菌 细胞内 提取出来 关键步骤二： 抗 虫基因 与运载体 DNA 连接 关键步骤三： 抗 虫基因 导入受体 ( 棉花 ) 细胞 ? 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 基因的 剪刀 —— 限制性内切酶 基因的 针线 —— DNA 连接酶 基因的 运载工具 —— 运载体 （一）限制性核酸内切酶 ——“ 分子手术刀” ? ⒈主要来源： 原核生物 识别 特定核苷酸序列 , 切断 磷酸二酯键 几种最常用的限制酶及其识别和作用位点 EcoR Ⅰ Sam Ⅰ GAATTC CTTAAG CCCGGG GGGCCC 2. 作用特点： Go back 3. 种类与命名： 现在已经从约 300 种微生物中分离出 与约 4000 种限制性内切酶 ( 限制酶 ) 。 E co R Ⅰ S ma Ⅰ 粘质沙雷氏杆菌 （ Serratia marcesens ） 大肠杆菌 （ Escherichia coli R ） Go back 练习：流感嗜血杆菌的 d 菌株 ( Haemophilus influenzae d ) 中先后分离到 3 种限制酶，则分 别命名为 : Hind Ⅰ 、 Hind Ⅱ 和 Hind Ⅲ EcoR Ⅰ 黏性末端 黏性末端 Go back 4. 作用结果： 产生黏性末端或平末端 EcoR Ⅰ 黏性末端 黏性末端 Go back 重复演示 Sma Ⅰ 平末端 平末端 Go back …… GAATTC …… …… CTTAAG …… …… GAATTC …… …… CTTAAG …… EcoR Ⅰ …… G AATTC …… …… CTTAA G …… …… G AATTC …… …… CTTAA G …… 不同来源的 DNA 片段混合 将不同种来源的 DNA 片段连接起来 生物 A 基因片段 生物 B 基因片段 …… G AATTC …… …… CTTAA G …… …… G AATTC …… …… CTTAA G …… 酶切 ( 二 ) DNA 连接酶 ——“ 分子缝合针” DNA 连接酶 可把黏性末端 之间的缝 隙 “ 缝合 ”起来，即把梯子两边扶手的 断口连接起来，这样一个重组的 DNA 分 子就形成了。 可把黏性末端之间的 缝隙“缝合” 起来， E· coli DNA 连接酶 或 T 4 DNA 连接酶 即 恢复被限制酶切开的两