生物化学：02蛋白质化学3.pptVIP

第四节蛋白质结构与功能 一、 蛋白质的一级结构决定其高级结构 牛核糖核酸酶 （RNase） 核糖核酸酶的变性与复性（C.Anfinsen，1960） 8mol/L尿素，巯基乙醇（HOCH2CH2SH） 变性还原核酸酶 透析去除尿素 巯基乙醇 空气氧 化巯基 随机重组4个正确配对二硫键的概率： 1/7x1/5x1/3=1/105 二、蛋白质的一级结构与功能 1.同功能蛋白质中氨基酸顺序的种属差异与生物进化 同源蛋白质与物种间的系统发生关系: 不同种属细胞色素C分子中氨基酸残基的差异 响尾蛇 鲤鱼 蜗牛 飞蛾 酵母 菜花 羊 人类 黑猩猩 防风 分子分类方法：进化树（系统发生树） 2.一级结构的微小差别可导致生理功能的重大不同：分子病——Pauling 例：镰刀形红细胞贫血（sickle-cell anemia） N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys · · · ·C(146) HbS （sickle-cell hemoglobin）β肽链： HbA （ adult hemoglobin） β 肽 链： N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys · · · ·C(146) 这种由基因突变使蛋白质分子结构及功能变异导致的疾病，称为“分子病”。 三、蛋白质的空间结构与功能 蛋白质的空间结构与其生物学功能密切相关，生物体中各种蛋白质都有自己特定的空间构象，这种构象与它们的功能是相适应的，如果空间构象发生了改变，蛋白质的生理功能也就随之消失。 1. 胰岛素的结构和功能 胰岛素和它的前体 不同来源的胰岛素氨基酸组成有差异 半胱氨酸位置固定 三对二硫键使不同来源的胰岛素具有相同的空间构象 2.血红蛋白的结构与功能 氧的结合诱导血红蛋白分子构象的变化 (低铁-氧,高铁-水) (E7) (F8) 近 氧合使Fe 2+落入卟啉环 氧合改变肌红/血红蛋白的构象 氧合作用显著改变Hb的四级结构，血红素铁的微小移动导致血红蛋白构象的转换（从T态→R态） T态（tense state）紧张态 氧亲和力低 R态（relaxed state）松驰态 氧亲和力高 （4）2，3—二磷酸甘油酸（BPG） 可降低血红蛋白与氧的亲和力 高负电荷 2，3—二磷酸甘油酸（BPG）支路 BPG对Hb氧合曲线的影响 正常人红血球含4.5mmol/L BPG，与血红蛋白等摩尔数 高山缺氧，BPG代偿性增高 严重阻塞性肺气肿，BPG代偿性增高 3.免疫球蛋白（immunoglobuing，Ig）的结构与功能 (1) 抗原与抗体的一般概念 抗原：能引起免疫反应的生物大分子（包括蛋白、核酸、多糖、毒素等）或病原体（细菌、病毒等）称为抗原。 抗体（免疫球蛋白）：血浆糖蛋白，由肝、脾、淋巴结等组织的网状内皮细胞合成。抗体的特点是特异性强，专一识别相应的抗原；多样性。 免疫球蛋白G( IgG ) 木瓜蛋白酶：2Fab，Fc 胃蛋白酶：F(ab)2 B细胞再次免疫主要抗体，血中最丰富抗体，唯一可通过胎盘抗体。 木瓜蛋白酶 胃蛋白酶 抗原结合部位 糖链 重链H 轻链L 铰链区 V；variable domain，可变区 C：constant domain，保守区 * 20世纪60年代， C.Anfinsen牛胰核糖核酸酶复性的经典实验 随机重组情况下：8巯基形成4个正确配对二硫键的概率为1/7x1/5x1/3=1/105 * 物种间的进化关系：一级结构差别小，系统发生位置相近。 * 574AA 纯合子：50%红细胞镰刀化；杂合子：1% 镰刀形细胞易破损造成血液血红蛋白低水平；更严重的后果是某些器官的毛细血管被这些长形异常细胞堵塞。 当疟原虫攻击这些携带者时，吃掉了血红蛋白，导致血液缺氧，红细胞 就变成了镰刀形，聚集起来了。免疫系统赶快调兵遣将来消灭这些镰刀形红 细胞，结果顺带把红细胞中的疟原虫也给消灭掉了。这样，携带者虽然在平 时的生存能力不如一般人，但是在疟疾流行时，他们的抵抗力反而强于一般 人，他们携带的镰刀形贫血症基因也就被保留了下来。 * Insulin - pdb 1b8h Carbon - Red Oxygen - Green Nitrogen - Blue Sulfer - Pink Red Cylinders - Alpha Helices Green planks - Beta sheets * 血红蛋白的主要功能是结合并转运氧气,它存在于血液的红细胞中.在红细胞成熟期间产生大量的血红蛋白,并失去细胞内的细胞器,血红蛋白以高浓度溶解于红细胞溶胶中. *