实验水中微量铁的测定.docxVIP

实验三 水中微量铁的测定 —— 邻菲啰啉分光光度法 一、实验目的 1．学习选择分光光度法实验条件的方法； 2．掌握分光光度法测定铁的基本原理及方法； 3．掌握分光光度计的使用方法。 二、实验原理 应用可见光分光光度法测定物质含量时，  通常将被测物质与显色剂反应，  使之生成有色 物质， 然后测量其吸光度，进而求得被测物质的含量。因此，  显色反应的完全程度和吸光度 的物理测量条件都影响到测定结果的准确性。 显色反应的完全程度取决于介质的酸度、  显色剂的用量、 反应的温度和时间等因素。  在 建立分析方法时，需要通过实验确定最佳反应条件。为此，可改变其中一个因素（例如介质 的  pH  值），暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液的吸光度，通过吸光度－  pH  曲线确定 显色反应的适宜酸度范围。其它几个影响因素的适宜值，也可按这一方式分别确定。此外， 加入试剂的顺序，离子价态，干扰物质的影响等都应加以研究，以便拟定合适的分析步骤， 使实验快捷、准确。本实验通过对 Fe2+-邻菲啰啉反应的几个基本条件实验，学习分光光度 法测定条件的选择。 邻菲啰啉法是测定微量铁的一种常用的方法。 一般情况下， 铁以 Fe3+状态存在时， 盐酸 羟胺可将其还原为 Fe2+，反应如下： 3+ 2+ + - 2 Fe ＋ 2 NH 2OH· HCl ═ 2 Fe +N 2 ↑ +4 H +2 H 2O+2 Cl 在 pH=2 9 的溶液中， 试剂与 Fe2+生成稳定的 1:3 橘红色配合物， 其 lgK 稳 =21.3，在 510 nm 有最大吸收， ε＝ 1.1 ×104 L·cm -1 mol -1。测定时， 控制溶液酸度在 pH=5 左右为宜。 酸度高 时反应较慢；酸度太低，离子则容易水解，影响显色。 Cu2＋ 、Co2＋、Ni 2＋ 、Cd2＋ 、Hg 2＋ 、Mn 2 ＋、Zn 2＋ 等离子也能与邻菲啰啉生成稳定配合物， 这些离子含量较低时不影响测定，含量较高时可用 EDTA 掩蔽或经分离除去。 本实验通过绘制吸收曲线选择最大吸收波长或选择适宜的测量波长； 通过变动某实验条 件，固定其余条件，确定测定最佳酸度和显色剂用量。 三、仪器和试剂 仪器： Unico 2100 型分光光度计（配 1 cm 比色皿）、酸度计（或精密 pH 试纸）、容量瓶、 刻度吸量管等。 试剂 － 1（准确称取 0.2159 g 分析纯硫酸铁铵（ NH 4 4 2 ·12H 2 O） 1. 铁标准溶液： 100 μ g· mL Fe (SO ) 于小烧杯中，加水溶解，加入6 mol ·L－ 1 HCl 溶液 5 mL ，定量转移至 250 mL 容量瓶中，用 水定容后摇匀，所得溶液每毫升含铁 0.100 mg） 2. 邻菲啰啉溶液： 0.2％（称取 1g 邻菲啰啉，先用 5～ 10 mL 95 ％乙醇溶解，再用蒸馏水稀 释到 500 mL ，临用前新配） 3. 盐酸羟胺水溶： 10％液（称取 10 g 盐酸羟胺溶于 100 mL 水中，临用前新配） 4. HAc-NaAc 缓冲溶液： pH＝ 4.6（称取 136 g 醋酸钠（ CH3COONa·3H2 O），加 60 mL 冰醋 酸，加水溶解后，稀释到 1000 mL ） 1 NaOH 溶液： 0.5 mol L· － 6. HCl 溶液： 1.0 mol L·1 四、实验步骤 条件试验 （ 1）吸收曲线的绘制和测量波长的确定：用吸量管吸取 0.00 mL 和 1.00 mL100 μg·mL － 0.2％邻菲啰啉溶液、 5 mL HAc-NaAc 缓冲溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置 10 min 后，用 1cm 比色皿，以试剂空白（即加入 0.00 mL 铁标准溶液）作参比溶液，分别测定波 长为 480、490、500、505、510、515、520、530、550、580 nm 时的吸光度。以波长 λ为横 坐标 , 吸光度 A 为纵坐标绘制吸收曲线， 从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长， 一般选择最 大吸收波长。 （ 2）溶液酸度的选择 （本实验暂不做此项） ：于 8 个 50 mL 容量瓶中，用吸量管各加 － 1 入 1.00 mL 100 μg·mL 的铁标准溶液， 加入 1 mL 盐酸羟胺溶液， 摇匀，再加入 1.5 mL 0.2 ％ 邻菲啰啉溶液，摇匀。然后用吸量管在此 8 个容量瓶中分别加入 － 1 HCl 溶液： 5.0 1.0 mol ·L mL 、0.3 mL ，0.0 mL ，0.5 mol － 1 L· NaOH 溶液： 0.2 mL 、1.5 mL 、3.8 mL 、3.9 mL 、4.0 mL 。 用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放