中药药理设计实验紫菀祛痰课件.pptVIP

中药药理设计实 验紫菀祛痰 实验目的 1. 了解酚红从呼吸道排泄的方法。 2. 观察紫菀及其炮制品种蜜紫菀在小鼠祛痰 的作用上的优劣。 实验原理 小鼠腹腔注射酚红后，酚红可部分经支 气管粘液腺分泌入气道，有祛痰作用的药物 在使支气管分泌液增加，因而可从药物对气 管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。 酚红在碱性溶液中呈红色，故以碱液清洗气 管后可用比色法（分光光度计）测出酚红的 排泌量。从而得出药物的祛痰作用。 材料与动物 器材：注射器、小试管、试管架、手术器 材、蛙板、大头针、 722 分光光度计 药品： 100% 紫菀煎液、 100% 蜜紫菀煎液、 0.5% 酚红溶液、 5%NaHCO3 、生理盐水。 动物：小白鼠 12 只（体重 18~22g ，雌雄各 半） 方法与步骤 1. 取小鼠 12 只，随机分成 3 组 , 每组 4 只，禁食不禁水 8 ～ 12h ， 第一组按 0.2ml/10g 体重灌胃 100% 紫菀煎液，第二组按 0.2ml/10g 体重灌胃 100% 蜜紫菀煎液，对照组给予同等 剂量的生理盐水， 45min 后腹腔注射酚红 0.5ml ， 15min 后脱颈椎处死，仰位固定于蛙板上手术分离气管。 2. 用 1ml 注射器吸取 0.5mlNaHCO3 , 推注入气管内，反复 连续推抽 3 次灌洗呼吸道，洗出液收集在试管中，按上述 方法重复 3 次。 3. 洗出液沉淀或离心，用 722 型分光光度计 （波长 546nm ）， 直接测浓度，计算祛痰指数，与对照组比较。 附注 1. 小鼠呼吸道的分离与冲洗 将小鼠仰位固定于蛙板上，剪开颈前皮肤，分离气管， 于喉头下将 8 号针头插入气管内约 0.3cm ，用丝线由气管 下结扎固定后，用 1ml 注射器吸取 5%NaHCO3 1ml ，通过针 头来回灌洗呼吸道 3 次，最后一次将灌洗液抽出注入试管 中。按上述方法连续操作 3 次，冲洗共 9 次，收得灌洗液 约 3ml ，置于试管中，静置或离心后取上清液，用分光光 度计检测浓度，与对照组比较。 2. 酚红标准液的配制 用电子天平准确称取一定量的酚红，以 5%NaHCO3 溶解， 使每 1ml 含酚红 1000 μ g 。然后依次稀释，配成每 ml 含 1.0 、 3.0 、 5.0 、 10.0 μ g ，用 722 型分光光度计测定，取其中 1 ～ 2 个浓度作为标准测定管。 实验结果 计算公式： 给药组浓度 × 100% 祛痰指数（ % ） = 对照组浓度 实验结果 注意事项 1. 给药至处死动物的时间必须准确。 2. 解剖时，须将气管周围组织去除干净， 气管段周围如果粘附有血液应立即用滤 纸吸净。 3. 呼吸道冲洗时， NaHCO3 用量要准确， 灌洗时动作要轻，以免穿破气管和肺脏， 抽推速度也尽可能相同，并尽可能将洗 液抽尽。