植物糖原运载提高黄酮生物利用率的研究.pdf

摘要 摘 要 黄酮 （flavone ，Fla ）具有广泛的生物学活性，可用于治疗和预防多种疾病， 特别是癌症、心血管和神经退行性疾病在内的退行性疾病。但是黄酮类化合物水 溶性差，导致其在体内的吸收效率差、生物利用率低，生物学活性难以充分发挥。 溶解度低也极大程度限制了 Fla 在水溶性基质的食品和药品等相关领域的应用。 植物糖原（phytoglycogen ，PG ）是由α-1,4 和 α-1,6 糖苷键连接的、高度支化 的可溶性α-D-葡聚糖，是一种天然纳米颗粒。本课题以PG 纳米粒为载体负载Fla ， 旨在提高Fla 的表观溶解度、生物活性及生物利用率。主要内容及结论如下： 选取 10 种不同结构的 Fla ，通过研究PG 对 Fla 表观溶解度的影响，分析 PG 与 Fla 产生相互作用的普遍规律，结果表明：PG 可以不同程度地提高除桑色素以 外的其他 9 种 Fla 的表观溶解度，PG 对 Fla 表观溶解度的影响与 Fla 自身的结构 有关，且大多数 Fla 的最大表观溶解度值与 Log P （理论计算或实验测得）呈显著 的线性负相关关系。以槲皮素 （Quercetin ，Qu ）为模式化合物，系统研究了 PG 浓度、Qu 浓度、pH 和盐离子对负载后 Qu 表观溶解度的影响，结果表明：5 mg/mL PG 与6 mg/mL Qu 在pH 7.7 的环境中负载得到的PG-Qu （phytoglycogen-quercetin， 植物糖原-槲皮素）复合物，其中 Qu 的表观溶解度可提高至47 μg/mL ，负载能力 和负载效率分别为 9.49 μg/mg 和 78.33% ；负载得到的 PG-Qu 负载液冻干后复溶 至 50 mg/mL，Qu 表观溶解度可提高近 180 倍，负载能力为 9.68 μg/mg ，负载效 率为 79.88% ；pH 低于 7 的环境下不利于负载；NaCl 和醋酸盐的存在不影响 PG 对 Qu 的负载效果，磷酸盐的存在会降低 PG 对 Qu 的负载。利用 PG 、玉米淀粉 （CS ）、蜡质玉米淀粉（WCS ）及其各自不同程度的酶解物（α-淀粉酶或淀粉葡 萄糖苷酶）负载Qu ，通过比较水解前后及不同酶解产物对 Qu 表观溶解度的影响， 探讨了 PG 与 Qu 产生相互作用的结构要素，结果显示：CS、WCS 以及二者经 α- 淀粉酶或淀粉葡萄糖苷酶的酶解产物均不能提高 Qu 的表观溶解度；PG 经 α-淀粉 酶或淀粉葡萄糖苷酶水解至不同程度，仍能显著提高 Qu 的表观溶解度，且彼此 无显著差异。表明：PG 平均链长短、分支度高是决定其与 Qu 相互作用的主要结 构要素，PG 对 Qu 的负载作用与PG 纳米粒的球形结构及粒径无关。制备了 PG-Qu 复合物；采用多种技术方法对 PG-Qu 复合物的结构表征进行分析，包括：利用动 态光散射激光粒度仪研究 PG-Qu 复合物的粒径分布，通过透射电镜观察复合物的 形貌，通过红外光谱、X-射线衍射研究 PG 与 Qu 的相互作用、负载前后 Qu 的存 在状态以及存在微环境的变化，结果表明：PG 负载 Qu 前后粒径无显著变化，平 均粒径为 68~72 nm，均呈均匀光滑的球形结构。Qu 以无定形的非晶体形式存在 I 摘要 与 PG-Qu 复合物中，氢键是 Qu 与 PG 发生作用的主要作用力。 研究了 PG-Qu 复合物的 pH 稳定性、抗氧化性、抑菌活性及癌细胞抑制作用， 结果表明：PG 负载 Qu 后不改变 Qu 在 pH ≤7 条件下的去离子水和醋酸盐缓冲溶 液中的稳定性，降低了其在 pH ＞7 去离子水和 pH ＞6 PB 中的稳定性。PG-Qu 复 合物的抗氧化活性均呈现良好的量效关系。PG 负载 Qu 提高了 Qu 的总还原力和 HO·清除能力。由于PG 对细菌生长的促进作用，PG-Qu 复合物的抑菌作用减弱。 PG 负载 Qu 后能显著提高水体系中 Qu 对 MCF-7 细胞和 A549 细胞增殖的抑制作 用，各组抑制率从大到小依次为 Qu/DMSO 组PG-Qu 组Qu/H O 组，且组间差