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目录
摘 要i
Abstractiii
缩略语表v
第一章 文献综述1
1.1研究问题的由来1
1.2 国内外研究现状分析2
1.2.1 白斑综合症病毒2
1.2.2proPO和Chst基因相关研究进展3
1.2.3 SNP 6
单核苷酸多态性 （ ）
1.3研究目的及意义7
第二章 克氏原螯虾Chst11基因cDNA 克隆及表达分析9
1 前言9
2 材料与方法9
2.1 实验动物9
2.2 主要试剂及仪器设备9
2.3 总RNA 的提取10
2.4 反转录11
2.5 Chst11基因序列的克隆12
2.6 Chst11序列分析18
2.7 Chst11在健康克氏原螯虾各组织中的表达分析19
2.8Chst11在病毒、细菌及CpG 免疫增强剂刺激下的表达分析20
3 结果与分析21
3.1Chst11基因的克隆及生物信息分析21
3.2 Chst11在克氏原螯虾不同组织中的表达分析24
3.3 克氏原螯虾Chst11基因在病毒、细菌及CpG 免疫增强剂刺激下的表达
分析25
4 讨论27
第三章 克氏原螯虾Chst 11在抗WSSV过程中的作用研究29
1 前言29
I
2 材料与方法29
2.1 实验动物29
2.2 主要试剂及仪器设备29
2.3 克氏原螯虾Chst11基因原核表达31
2.4 Chst11重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的作用35
2.5Chst11重组蛋白对WSSV 复制的影响35
3 结果与分析36
3.1Chst11蛋白的表达与纯化36
3.2 Chst11对WSSV 复制的影响37
3.3Chst11对克氏原螯虾免疫相关基因的影响38
3.4 Chst11蛋白对WSSV 感染克氏原螯虾死亡率的影响39
4 讨论40
第四章proPO重组蛋白在克氏原螯虾抗WSSV过程中的研究42
1前言42
2 材料与方法42
2.1 实验动物42
2.2 主要试剂及仪器设备43
2.3 引物设计43
2.4 克氏原螯虾在WSSV 感染下proPO 的表达水平44
2.5 克氏原螯虾proPO 的原核表达44
2.6proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响46
2.7proPO重组蛋白对克氏原螯虾体内WSSV 复制的影响47
2.8proPO重组蛋白对WSSV 感染的克氏原螯虾死亡率的影响47
3 结果与分析47
3.1proPO在WSSV 刺激下的表达模式47
3.2proPO重组蛋白的表达与纯化48
3.3proPO重组蛋白对WSSV 复制的影响49
3.4proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响50
3.5proPO重组蛋白对WSSV 感染克氏原螯虾死亡率的影响52
4 讨论52
II
proPO WSSV
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