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卵黄免疫球蛋白Fab 片段的制备及其对脂多糖诱导RAW264.7 细胞的炎症的影响
目录
摘要i
ABSTRACT iii
缩略语表vi
第一章绪论 1
1 IgY 的结构与活性片段2
2 Fab 和Fc 片段的制备3
2.1 IgY 的酶解方式3
2.2.1 木瓜蛋白酶酶解3
2.2.2 胃蛋白酶酶解4
2.2 Fab 片段和Fc 片段的分离纯化4
2.2.1 盐析4
2.2.2 超滤法5
2.2.3 色谱法5
2.2.4 Gradiflow 技术6
3 IgY 及其Fab 片段抗炎症活性研究6
3.1 炎症的形成机理6
3.2 巨噬细胞的免疫调节6
3.3 哺乳动物免疫球蛋白IVIg 和巨噬细胞的相互作用7
3.3.1 IVIg 与巨噬细胞的膜表面受体的相互作用7
3.3.2 血红素加氧酶-1 通路8
3.3.3 IVIg 毒中和作用9
3.4 Fab 的抗炎症活性研究9
3.5 IgY 的研究进展 10
4 选题意义 10
5 研究内容 11
第二章 两种蛋白酶酶解制备IgY 活性片段研究 13
1 材料与方法 14
I
华中农业大学2020 年学术学位硕士毕业论文
1.1 材料与试剂 14
1.2 主要仪器 14
1.3 试验方法 14
1.3.1 IgY 的制备 14
1.3.2 IgY 的表征 15
1.3.2 蛋白质的木瓜蛋白酶酶解条件优化 16
1.3.3 胃蛋白酶酶解条件优化 17
1.3.4 Western blotting 试验 18
1.3.5 胃蛋白酶解制备Fab 片段的分离纯化 18
2 结果与分析 19
2.1 IgY 非还原型SDS电泳图 19
2.2 SEC-HPLC 分析IgY 样品纯度20
2.3 木瓜蛋白酶酶解条件优化21
2.3.1 IgY 和木瓜蛋白酶用量比21
2.3.2 半胱氨酸的用量22
2.3.3 酶解时间23
2.3.4 酶解条件的优化24
2.4 胃蛋白酶酶解条件优化26
2.4.1 IgY 与胃蛋白酶质量比对酶解效率的影响26
2.4.2 酶解时间对酶解效率的影响27
2.5 酶解溶液的western blotting 分析28
2.6 胃蛋白酶解制备Fab 片段的分离纯化29
4 本章小结31
第三章 IgY 木瓜蛋白酶酶解Fab 片段的分离纯化
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