叶片间断失绿水稻材料B03S的叶色变化机理研究.pdfVIP

叶片间断失绿水稻材料B03S 的叶色变化机理研究 目录 摘要i Abstractiii 1前言1 1.1 问题的由来1 1.2 植物叶片突变性状研究综述2 1.2.1植物叶色突变的形成2 1.2.2 植物叶色突变的分类3 1.2.3植物叶色突变的生理、遗传基础4 1.2.4 植物叶色突变的形成机理6 1.2.5植物叶片突变体的研究与应用价值8 1.3 叶片间断失绿特性水稻材料的培育与前期研究9 1.4 本研究的目的和意义10 2 材料与方法11 2.1实验材料及技术路线11 2.1.1实验材料11 2.1.2 技术路线11 2.2 叶片间断失绿性状的诱导处理12 2.2.1实验材料的种植及处理12 2..2.2 实验材料的采集12 2.3生理指标测定13 2.3.1 叶绿素含量测定13 2.3.2 间断失绿材料的碘染13 2.3.3可溶性糖和淀粉含量测定13 2.3.4 样品中的蔗糖含量测定16 2.4 相关基因表达测定与分析18 2.4.1总RNA 的提取18 2.4.2DNase Ⅰ处理及RNA 质量检测19 2.4.3反转录及产物的PCR 检测19 2.4.4 引物设计及qPCR 分析20 3 结果与分析23 3.1叶片间断失绿性状的诱发条件研究23 3.2 不同诱发条件下生理变化27 3.2.1叶片间断失绿材料的碘染实验27 3.2.2 色素含量测定28 3.2.3可溶性糖和不溶性淀粉含量比较分析28 3.2.4 蔗糖含量比较分析30 3.3转录组差异表达基因的筛选与验证30 3.3.1RNA 质量及反转录检测31 3.3.2 基因表达相对定量分析31 4 讨论35 4.1间断失绿性状诱发条件的确定35 I 华中农业大学2020 届硕士研究生学位论文 间断失绿性状与移栽之间的关系35 间断失绿性状与温度之间的关系36 4.2 间断失绿性状发生的生理基础36 光合作用产物供应与叶绿素合成36 糖代谢与转运与叶绿体发育37 4.3 叶片间断失绿性状产生的调控机理38 结论42 参考文献43 致谢51 II 叶片间断失绿水稻材料B03S 的叶色变化机理研究 摘要 在培育具有叶色标记的光温敏核不育水稻材料的育种后代中发现一种新型 叶色突变体材料B03S。该材料在移栽后其叶鞘和叶片上均出现垂直于叶脉方向 的间断失绿性状，表现出典型的如斑马条纹，一般2-3 片叶同时出现，稳定出现 12 历期 天左右，此后新长出的叶片为正常绿叶。为研究该叶色突变体材料的性 状形成与机理，本研究通过直播、不同移栽方式、覆土处理、剪根处理、不同温 度条件、不同秧龄与生长时期处理等方法确定其斑马叶性状发生的诱发条件、稳 定性与变化规律，分析不同温度、不同秧龄与发育时期等条件对斑马叶性状表现 影响。对斑马性状发生过程的色素含量，可溶性糖、淀粉以及蔗糖含量等生理指 标进行了测定。在不同时期、不同部位的叶色发育相关基因的表达水平进行了分 析与qPCR 验证。主要研究结果如下：