大肠杆菌还原法制备贵金属纳米颗粒及其用于黑色素瘤治疗研究.pdfVIP

华中农业大学2020 届硕士研究生学位 （毕业）论文 目 录 摘 要i Abstract ii 缩略词表iv 第一章 绪论 1 1.1 恶性黑色素瘤的产生与危害 1 1.2 传统癌症治疗手段 1 1.2.1 化学药物治疗 1 1.2.2 放射治疗 2 1.3 纳米技术用于癌症治疗 3 1.3.1 化学动力学治疗 4 1.3.2 光热治疗 6 1.4 免疫检查点抑制剂用于癌症治疗 8 1.5 细菌治疗癌症 11 1.6 本论文设计思路和技术路线图 14 1.6.1 设计思路 14 1.6.2 技术路线图 16 第二章 大肠杆菌负载金铂纳米颗粒用于恶性黑色素瘤的化学动力学和免疫联合治 疗 17 2.1 前言 17 2.2 主要仪器，细胞株与试剂 18 2.2.1 主要仪器 18 2.2.2 主要细胞株 18 2.2.3 主要试剂 19 2.3 实验方法 20 2.3.1 Bac-Au@Pt 材料的制备 20 2.3.2 Bac-Au@Pt 的表征分析 21 2.3.3 Bac-Au@Pt 的DCFH 荧光染色实验 21 2.3.4 Bac-Au@Pt 的TMB 显色实验 21 II 大肠杆菌还原法制备贵金属纳米颗粒及其用于黑色素瘤治疗研究 2.3.5 Bac-Au@Pt 的ESR 测试 22 2.3.6 Bac-Au@Pt 的细胞内ROS 测试 22 2.3.7 Bac-Au@Pt 的诱导细胞膜脂质过氧化流式分析 22 2.3.8 Bac-Au@Pt 的诱导癌细胞线粒体内膜去极化流式分析 23 2.3.9 Bac-Au@Pt 的Western-blot 实验 23 2.3.10 Bac-Au@Pt 的凋亡染色流式分析 24 2.3.11 Bac-Au@Pt 的的细胞毒性实验 24 2.3.12 Bac-Au@Pt 的动物治疗 25 2.3.13 Bac-Au@Pt 和anti-PD-L1 的免疫治疗 25 2.4 结果与讨论 26 2.4.1 Bac-Au@Pt 的材料表征 26 2.4.2 Bac-Au@Pt 的体外催化产生活性氧测试 28 2.4.3 Bac-Au@Pt 的细胞内活性氧测试，线粒体内膜去极化和细胞膜氧化损 伤流式分析 29 2.4.4 Bac-Au@Pt 的Wstern-blot 实验和PI 凋亡染色流式分析 31 2.4.5 Bac-Au@Pt 的细胞毒性实验 32 2.4.6 Bac-Au@Pt 和anti-PD-L1 的动物治疗 33 2.4.7 小鼠的恶性黑色素瘤基因组学分析 35 2.5 本章小结 36 第三章 生物杂交纳米片用于恶性黑色素瘤的光热和免疫联合治疗 37 3.1 前言 37 3.2 主要仪器，细胞株和试剂 39 3.2.1 主要仪器 39 3.2.2 主要细胞株 40 3.2.3 主要试剂 40 3.3 实验方法 41