发酵过程控制技术 03-03酵母菌的死活细胞鉴别与镜检计数 引导文-酵母菌的死活细胞鉴别与镜检计数.docVIP

天津现代职业技术学院 PAGE 11 子情境：引导文 活性干酵母发酵过程检验 酵母菌的死活细胞鉴别与镜检计数 阅读材料 阅读材料 材料一：酵母菌的简介 酵母一群单细胞真菌的统称，这个术语是无分类学意义。（凡是生活史中大部分以单细胞生活的、主要营出芽繁殖的一类低等真菌，统称为酵母菌。）在分类学上分别归属于：子囊菌亚门、担子菌亚门、半知菌亚门。 酵母菌的主要特点是：个体一般以单细胞存在；多数营出芽繁殖；能发 酵糖类产能；细胞壁常含甘露聚糖；常生活在含糖量较高、酸度较大的水生环境中。 酵母菌多分布在含糖的偏酸性环境，也称为“糖菌”，多分布于水果、蔬菜、叶子、树皮等处，及葡萄园和果园土壤中等，是一类腐生性生物。酵母菌不能以CO2为主要碳源，必须以有机碳化合物，主要是葡萄糖等单糖为碳源和能源 酵母是人类的第一种“家养微生物” 在食品工业中常用来酿酒和发面，在生物工程中常用来进行乙醇和甘油发酵，石油脱蜡，生产单细胞蛋白（SCP），提取核酸、麦角甾醇、辅酶A、细胞色素C、维生素和凝血质等生化药物等。此外，重要的科研模式微生物，常用来进行基因工程操作。但是，有些酵母菌具有危害性，例如皮肤、呼吸道、消化道、泌尿生殖道 （白色念珠菌）疾病；果酱、蜂蜜变质（高渗酵母）；污染发酵工业（酱油、酱类、腐乳表面生白花、产酸臭— 醭膜酵母） 完成下列信息！ 什么是酵母菌，其主要特点有哪些 什么是酵母菌，其主要特点有哪些？酵母菌在工业上有何应用？ 材料二：酵母菌的形态特征 一、酵母菌的个体形态 酵母菌大多数为球状、卵圆、椭圆、圆柱等单细胞，有的酵母菌子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母，假丝酵母的子细胞与母细胞常连在一起形成链状，称为假菌丝。酵母菌个体形态具体有六种： 1）圆形 圆球酵母 2）椭圆形 葡萄酒酵母 3）卵圆形 啤酒酵母 4）柠檬形 汉逊氏酵母 5）腊肠形 巴斯德酵母 6）假丝状 假丝酵母 二、酵母菌的大小 酵母菌长约5~20um，可达50um；宽约1~5um，可达10um以上；比细菌粗10倍左右。一般用高倍镜（40×10）观察。酵母细胞的大小与培养方式、菌龄、制片方式有关。一般成熟细胞比幼龄细胞大；菌体在液体培养基中比在固体培养基中大。 三、芽殖酵母的形态 芽殖是酵母主要的无性繁殖方式。成熟细胞长出一个小芽，到一定程度后脱离母体继续长成新个体。方式可分为多边出芽（最普遍），两端出芽和三端出芽。 请回答： 请回答：酵母菌个体形态有几种？酵母菌的大小及芽殖酵母的形态是怎样的？ A 微生物菌体 B微生物代谢产物 C微生物酶制剂 材料三：酵母菌死活细胞的鉴别 一、鉴别的原理 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈兰色，还原型无色，用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由兰色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈兰色或淡兰色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 二、鉴别的步骤 1.染色：在干净的载玻片中央加一小滴0.1%美蓝染色液，然后再加一小滴预先稀释至适宜浓度的酵母发酵液，混匀后从侧面盖上盖玻片，并吸去多余的水分和染色液（注意染色液和菌液不宜过多或过少，并应基本等量，而且要混匀）。 2.镜检：将制好的染色片置于显微镜的载物台上，放置约3min后进行镜检，先用低倍镜，后用高倍镜进行观察，根据细胞颜色区分死细胞（蓝色）和活细胞（无色），并进行记录。 3.比较：染色约30min后再次进行观察，注意死细胞数量是否增加。 请简述美兰染色法鉴别酵母细胞的原理及步骤？活死酵母细胞的颜色各是怎样的？ 请简述美兰染色法鉴别酵母细胞的原理及步骤？活死酵母细胞的颜色各是怎样的？ 材料四：酵母菌细胞的镜检计数 一、显微镜直接计数法原理 酵母菌细胞的镜检计数主要采用显微镜直接计数法，该方法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有特定面积和容积的载玻片上(又称计菌器），于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数。 二、血球计数板的构造 利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半。 每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为几个大方格，中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1，计数室的刻度一般有两种规