金匮肾气丸对脾肾阳虚型原发性肾病综合征患儿临床疗效观察及外周血淋巴细胞P-gp170蛋白表达意义研究.docVIP

PAGE 1 XX科研项目合同书 编号： 项 目 名 称： 金匮肾气丸对脾肾阳虚型原发性肾病综合征患儿临床疗效观察及外周血淋巴细胞P-gp170蛋白表达意义研究 项 目 主持人： 电 话： 签 订 日 期： XX科技厅 一、研究项目的立题依据，国内外研究动态，特色和创新处，应用前景和科学意义 原发性肾病综合征(Primary nephrotic syndrome,PNS)是由国外学者Christian于1932年提出的,临床上以大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症及不同程度水肿（三高一低）为主要特征,是儿童常见的肾小球疾病。目前PNS国内外广泛采用糖皮质激素（Glucocorticoid，GC)治疗，其预后很大程度上取决于患儿对糖皮质激素的反应。临床上以泼尼松足量治疗8周时效应分为激素敏感型肾病综合征（steroid sensitive nephrotic syndrome，SSNS）和激素耐药型肾病综合征(steroid resistent nephrotic syndrome，SRNS)。SRNS属于难治性肾病综合征（refractory nephrotic syndrome，RNS）范畴，其由于体内大量蛋白丢失及持续性尿蛋白的影响导致肾小管间质纤维化进一步加重肾脏病变,预后不容乐观，是引起儿童终末期肾脏疾病的主要原因之一，因此，尽快找出GC耐药的原因及病情复发的因素是临床医师极其重要的任务，可为RNS制定合理治疗方案，改善预后提供可行的依据。 目前现代医学针对难治性肾病综合征的治疗，往往只能通过加大激素的剂量、延长激素治疗疗程、更换激素剂型、联合使用免疫抑制剂等方案进行干预，虽然取得一定疗效，但是长期使用激素和免疫抑制剂也带来了一系列不良反应及影响，包括：①病情迁延不愈。②副反应大。③药物价格昂贵，给普通家庭带来严重的经济负担。因此，研究激素耐药的机制一直是国内外肾脏专科医师一直关注研究的热点，如何提高激素敏感性，减少激素带来的不良反应，提高难治性肾病的治愈率更是具有重要临床研究意义。 现代医学对儿童肾病综合征及P-gp170蛋白的研究进展 近年来国内外对激素耐药确切的机制还尚未有定论，有观点认为GC进入体内首先与糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor，GR)结合形成GC-GR复合物才能发挥药物治疗作用，因此凡能影响GC在体内生物利用（如代谢、分布、排泄等）过程的任何环节均能影响GC的生物学效应导致激素耐药发生。随着医学发展，不断深入研究发现多药耐药基因(multidrug resistance-1，MDR-1)的产物P糖蛋白170(Permeability-glycoprotein，P-gp170)与糖皮质激素耐药、疗效及预后有关。有研究发现[1]P-gp170是广泛存在于体内细胞膜表面的一种高效药物转运泵，参与糖皮质激素的摄取、代谢和排泄，影响糖皮质激素药物代谢动力学。其重要的作用机制是GC进入体内在未与靶GR受体结合之前，P-gp170即与GC结合，利用其药泵的活性作用，将尚未发挥激素药物效应的GC排出细胞外，减少细胞体内GC的浓度，最终导致耐药的发生。 原发性肾病综合患儿P-gp170的表达与激素耐药的关系一直是国内外学者研究的热点。Stachowski等[2]发现，SRNS患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)膜表面MDRl基因表达水平及P-gp170活性均较SSNS患儿及正常对照组显著升高，推测INS患儿GC耐药可能与MDRl及P-gpl70的过度表达所导致的PBMC内GC水平降低有关。付强等[3]采用流式细胞术检测30例PNS患儿PBMC P-gpl70的表达，发现SRNS组患儿PBMC P-gpl70表达量显著高于SSNS组患儿，且PNS患儿激素治疗前PBMC P-gpl70表达量与INS活动、复发及病理有关，提示其可做为临床判断预后的指标。关凤军等[4]纠和孙晓华[5]分别用Western blot法和免疫组织化学法检测INS患儿PBMC膜和肾组织P—gpl70的表达量，发现INS患儿PBNIC和肾组织均有P-gpl70表达，且表达增高。认为P-gpl70至少参与一部分继发耐药机制，P-gpl70的表达与INS预后有一定关系，P-gp