AM-AM-FS-Ac-19038 蜂蜜中脯氨酸.docVIP

PAGE PAGE 1 AMAMFSAc19038 蜂蜜 脯氨酸 吸光光度法 AM-AM-FS-Ac-19038 蜂蜜中脯氨酸 1.原理概要 脯氨酸是蜂蜜中的主要游离氨基酸，它与酸性茚三酮溶液反应形成有色化合物。来自其它氨基酸的干扰可忽略不计（≤5%）。 2.仪器和试剂 2.1 仪器 反应管——18×13Omm硼硅玻璃，有螺旋盖的管，带聚四氟乙烯衬垫。 2.2 试剂 (a)茚三酮溶液——3%。将3.0g茚三酮溶解于100ml不含过氧化物的乙二醇单甲醚中。将溶剂（不是试剂）保存于有金属锌的琥珀色瓶中。 (b)L-(-)-脯氨酸——在真空干燥箱中干燥，然后保存于保干器中。按下述方法制备标准溶液:(1)贮备液——0.5mg/ml H2O，将25mg脯氨酸用水溶解并定容至5Oml。低温保存。(2)工作液——50μg/ml。用水将1Oml贮备液稀释到1OOml。每天新配制。 3.试验过程 称量2.5OOg蜂蜜转移至5Oml容量瓶中，用水稀释至刻度。用移液管向3个反应管中分别移取0.5ml，加0.25ml甲酸及1.OOml苟三酮溶液。盖紧盖子，摇匀后放在沸水浴中15min。在99℃的水浴中冷却5min，打开盖子，向每个反应管中分别加入5ml水合异丙醇(1+1)。混匀，然后以水做空白对照测定样品在52Onm处的吸光度A，在冷却的35min内把所有的样品测量完