实验五小肠平滑肌生理特性的观察与分析.docVIP

实验五小肠平滑肌生理特性的观察与分析 【实验目的】 学习哺乳动物离体肠标本制备及灌流方法。 观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因索对舒缩活动的影响。 【实验原理】 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有白律性。相比Z下 消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩，对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏 感等特性。小肠离体后，置于适宜的溶液屮，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。 【材料与方法】 一、 实验动物：家兔 二、 器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器（量稈为25g以下）、BL-410生物记录系统、L型通 气管、道氏袋、注床01%去甲肾上腺素、 气管、道氏袋、注床 0.01%乙酰胆碱、lm （二）仪器连接上实验装置连接（三、方法与步骤（―）标本制备此取长20?30cm的斤扎两端内侧剪断，耳D2-3cm,两端各系一肠管的一半暴露于空张力换能務十二指肠交界处。由 分别用线结扎，于结 事分成数段，毎段长 室温台氏液屮，同时锅及灌流浴槽高度也探测灌流浴槽中的温气管钩上，另一端耳磨擦影响记录，将换量，使空气从通气管号系统记录小肠平涓图7-5标本连接示意图 （二）仪器连接上实验装置连接（ 三、方法与步骤 （―）标本制备 此取长20?30cm的斤 扎两端内侧剪断，耳 D 2-3cm,两端各系一 肠管的一半暴露于空 张力换能務 十二指肠交界处。由 分别用线结扎，于结 事分成数段，毎段长 室温台氏液屮，同时 锅及灌流浴槽高度也 探测灌流浴槽中的温 气管钩上，另一端耳 磨擦影响记录，将换 量，使空气从通气管 号系统记录小肠平涓 图7-5标本连接示意图 L型固定杆 泪度计 供气管 〃 生理涪港 腹盧肌条 恒洱浴槽 排水管 验前将台氏液加入浴 时，需用温度计随时 .将肠段一端系在通 和温度计接触，以免 的螺丝夹，控制通气 I泵供气）。用生物信 BL?410系统的使用 选择“实验项目”屮的“消化实验”选屮“消化道平滑肌生理特性”。 相关参数设置的参考值：时间常数T-DC,高频滤波F-3OHz,显速一4.00S/div,增益一lOOg 用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩Illi线稳定后, 单击记录按钮。 （三）观察指标：H定。 （四）观察项目 1、 待标木稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。 2、 乙酰胆-碱的作用 用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1?2滴。观察到明显效应后，立即从 排水管放出浴槽内含乙酰腹碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留 的乙酰胆碱，使Z达到无效浓度，待小肠运动恢复后进行下一项。 3、 去甲肾上腺索的作用 按上述方法将0.01%去甲肾上腺索加入浴槽内1?2滴，观察小肠运动的反应。 当效果明显示，立即更换台氏液。 4、 氯化鈣的作用 加2%CaCl2溶液2?3滴入灌流浴槽内，观察其反应，效果明显后迅速冲洗。 5、 盐酸的作用 加1?2滴1 mol/LHC1溶液入浴槽内,观察其反应。 6、 氢氧化钠的作用在（5）基础上加等容量的1 mol/L NaOH溶液入浴槽内，观察其反应。按上述方法 更换台氏液，反父冲洗。 7、 温度的影响将浴槽内台氏液放出，注入25°C台氏液，观察平滑肌收缩有何改变，当效应明显后再 换入38°C台氏液，持续一段时间后，再换入42°C台氏液，观察收缩活动的变化（亦可根据室温的 具体情况选做其屮的一项）。 【实验结果】 测量实验结果，剪辑打印曲线，H行设计表格。 【注意事项】 实验过稈中必须保证标木的供氧（通气）及浴槽内台氏液的恒温（38°C）O 灌流浴槽内的液面高度应保持恒泄。 放人髀零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。 上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加。 每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌出现不可逆反应。 每项处理必须有处理标记。 【要求与思考】 课前复习生理学“消化道平滑肌生理特性”理论教学内容和台氏液的成份、酸碱度及用途。 预测观察项目屮各项处理的预期结果。 取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉下进行？ 要保持小肠平滑肌较好的活性，实验过程中要注意什么？ 制备小肠平滑肌标木时，为什么要取小肠上段，尤其是十二指肠段的平滑肌？ 结合你对木实验方案的理解和机能实验室条件，你认为木实验屮应观察哪些指标？ 如何从记录1111线屮观察分析小肠平滑肌的生理特性？若出现非预期现象分析其原因。 【作业题】 从记录曲线中观察分析小肠平滑肌与心肌、骨骼肌的收缩特性有何不同?说明其原理。 通过观察分析记录Illi线变化，阐明各项处理引起的收缩频率、收缩强度和张力变化的机理。