聚L-精氨酸修饰柔性石墨烯平面电极对黄嘌呤的选择性检测.docxVIP

聚L-精氨酸修饰柔性石墨烯平面电极对黄嘌呤的选择性检测 黄嘌呤（XA）是一种嘌呤碱，广泛分布在人体和其它生物的器官和体液中，常用作温和的兴奋剂和支气管扩张剂，特别用于治疗哮喘症状。同时，XA也是嘌呤代谢的产物，在黄嘌呤氧化酶的作用下转化为尿酸（UA）。UA是嘌呤在人体中代谢的最终产物。在正常情况下，体内UA的产生和排泄处于相对平衡的状态。体内UA产生过多或排泄机制失衡容易导致体内UA滞留，使人体体液变成酸性，影响人体细胞的正常功能。次黄嘌呤（HX）广泛存在于人体血液、肝脏和尿液中，是嘌呤核苷酸分解代谢的中间产物，也是检测心脏代谢是否异常的重要生化指标之一。在临床诊断中，体液中UA、XA和HX的浓度与多种疾病有关，包括黄嘌呤尿症、痛风、高尿酸血症、肾衰竭和某些先天性代谢疾病[1，2]。准确检测UA、XA和HX对人体代谢系统的稳定性和相关疾病的早期临床诊断具有重要意义。但是，3种嘌呤衍生物通常在人体中同时存在，且涉及HX→XA，XA→UA及其它复杂的转化途径。因此，选择性测定嘌呤代谢中间体XA和同时测定UA、XA和HX在临床检测中具有重要意义。 目前，检测XA的方法有毛细管电泳法（CE）、气相色谱法、液相色谱法（HPLC）、分光光度法、化学发光法和酶法等。这些方法通常操作复杂，设备和材料昂贵，样品制备严格且耗时较长[10，11]。此外，黄嘌呤氧化酶（XOD）生物传感器重复性和稳定性低，固定流程复杂，容易受温度和pH值的影响[12～14]。因此，开发低成本、高灵敏度和快速响应的非酶电化学传感器十分必要。 石墨烯是由sp2杂化的碳原子组成的单原子厚度的二维网状结构的碳纳米材料，已广泛用于基础和应用研究中，例如超级电容器、电池和燃料电池等[15，16]。由于石墨烯具有大的比表面积、高的导电性、化学惰性、良好的透明性和机械性能，在电化学传感器领域引起了越来越多的关注。石墨烯可以通过多种技术制备，如化学气相沉积（CVD）法、外延生长法、机械剥离法和氧化还原法等。石墨烯膜修饰电极通常由滴涂石墨烯的均匀分散液或还原氧化石墨烯（GO）制得，但通过这两种方法制备的石墨烯薄膜容易导致石墨烯在电极表面发生团聚且产生较多缺陷，因而无法精确控制修饰电极的薄膜厚度，电极的导电性和重现性不佳[22～24]。 CVD石墨烯因其具有结构缺陷少、层数可控、电化学性能好等优势，非常适用于电化学传感等的研究，其边缘和基面都具有出色的电催化活性。在本研究组之前的工作中，将 CVD 石墨烯的边缘制备成纳米电极，研究了其对UA、抗坏血酸（AA）和肾上腺素（EP）等生物分子的电催化作用。在此基础上，将金属Cu纳米颗粒电沉积在上述石墨烯纳米电极表面，制备了灵敏的非酶葡萄糖传感器。另一方面，将Cu基底上的 CVD 石墨烯转移到柔性的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）表面，得到GPE。然后在 GPE 上修饰铁氰化钴纳米颗粒，作为过氧化氢传感器; 修饰L-半胱氨酸，作为多巴胺（DA）和AA传感器; 修饰金铂双纳米粒子和L-半胱氨酸，作为EP传感器。 L-精氨酸（L-Arg）是维持婴幼儿生长发育的必需氨基酸，是鸟氨酸循环的中间代谢物，能促使氨转变成为尿素，从而降低血氨含量。L-Arg也是精子蛋白的主要成分，有促进精子生成，提供精子运动能量的作用。此外，静注精氨酸，能刺激垂体释放生长激素，可用于垂体功能试验。由L-Arg氧化形成的α-氨基自由基可以连接在电极表面上，进而形成P（L-Arg）聚合物薄膜，用于电化学检测。Wang等构建了基于P（L-Arg）修饰的玻碳电极，实现了DA和EP的同时检测; Cao等制备了基于金纳米颗粒/ P（L-Arg）/多壁碳纳米管复合膜修饰的玻碳电极，构建了酪蛋白电化学免疫传感器。在本工作中，将L-Arg通过电化学方法沉积在GPE表面，构建了柔性聚（L-Arg）/GPE（P（L-Arg）/GPE）。由于CVD石墨烯和L-Arg的协同作用，P（L-Arg）/GPE传感器具有优越的电催化活性，不仅可以独立检测XA，还可以同时检测XA、UA和HX。图1是P（L-Arg）/GPE的制备和检测示意图。 2实验部分 2.1仪器与试剂 *****型电化学工作站（上海辰华仪器有限公司），电化学测定采用三电极系统： 工作电极为GPE和P（L-Arg）/GPE，参比电极为Ag/AgCl电极，对电极为铂丝电极; Sartorius PB-10 pH计（德国 Sartorius公司）; 7401F扫描电子显微镜（SEM）和能谱仪（EDS）一体机（日本JEOL公司）; Lab Ram HR Evolution拉曼（Raman）光谱仪 （日本HORIBA公司）。 Cu基底的少层CVD石墨烯（深圳六碳科技有限公司）;