水松种质资源保育与植物景观应用研究.pdfVIP

浙江大学硕士学位论文 摘要 摘 要 水松（Glyptostrobuspensilis）作为一种古老的孑遗植物，是植物中的“活化 石”，拥有珍贵的基因资源。近年来，水松野外种群的数量大幅锐减，已被中国 植物红皮书列为濒危树种。针对目前在水松种质资源保育研究领域中存在的不 足，以及水松在景观应用领域中实践的空白，本研究综合运用植物组织培养、分 子标记技术手段和植物造景的方法，开展水松种质资源保育方法的研究，并进行 水松在植物造景中具体应用方式的探索与实践。主要研究结果如下： （1）建立水松未成熟胚培养及其组培快繁体系，开展野外回归的研究。研 究发现，水松未成熟胚（8-11月份采收的样品）在1/2DCR培养基中培养7-10d 后，可诱导发育成完整植株，获得水松无菌苗。以水松无菌苗的下胚轴作为离体 1/2MS 6-BA NAA0.5mg/L 培养材料，在 附加不同浓度的 和 培养基上进行快速 繁殖，均能诱导出愈伤组织和不定芽。结果表明，在1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+VC5.0mg/L+蔗糖24.0g/L+琼脂8.0g/L培养基上诱导不定芽，诱导率 可达 ，每个下胚轴能够诱导的不定芽数目平均可达 个。取生长至 100% 2.4 3-4cm 的不定芽接种在1/2MS+IBA0.1mg/L+VC5.0mg/L+蔗糖24.0g/L+琼脂8.0g/L 培养基上能够有效诱导不定芽生根，生根率达20%。生根40d后可进行移栽和 炼苗，在苗圃中培育 月后回归野外环境，回归苗成活率达 。 1-2 90% （2）建立并优化水松SRAP-PCR反应体系，以此为基础对种源及后代群体 进行遗传多样性分析。结果表明水松SRAP-PCR最优反应体系为：模板DNA用 100ng dNTPs 0.4mmol/L Mg2+ 2.5mmol/L ExTaq 1.5U 量 ， 浓度 ， 浓度 ， 酶用量 ， 0.5μmol/L DNA 140ng dNTPs 0.3mmol/L Mg2+ 引物浓度 ；或模板 用量 ， 浓度 ， 浓度 ， 酶用量 ，引物浓度 。使用筛选后的 2.0mmol/L ExTaq 1.5U 0.7μmol/L 反应体系可筛选出 对条带清晰稳定、多态性效果好的引物，进而 SRAP-PCR 18 对种源及其后代群体进行遗传多样性分析。结果表明，两个种源植株 和 P1 P2 0.9298 P1 P2 0.7511 的遗传变异系数为 ，种源 、 与子代群体间平均遗传相似系数为 ， S1-S8 0.7676 P1 P2 子代 的平均相似系数为 。由此可以看