IL-13诱导足细胞损伤及其作用机制的研究教学PPT课件.ppt

IL-13诱导足细胞损伤及其作用 机制的研究 研究背景 FSGS和MCD在临床上都突出表现为大量蛋白尿，近年来的研究，尤其是对肾小球足细胞研究，发现足细胞是MCD和FSGS肾组织病变形成的主要靶细胞，并将它们列为最有代表性的足细胞病. 研究表明，免疫因素，尤其是T细胞功能异常，释放细胞因子导致足细胞损伤与患者蛋白尿的形成有关 . IL – 13是活化的Th2细胞分泌的重要的细胞因子之一 。FSGS复发的患者中，CD4+和CD8+ T细胞IL-13的mRNA和蛋白表达增高。FSGS患者肾组织IL-13 mRNA水平升高，并且与患者的肾功能和蛋白排泄呈正相关。转基因动物研究发现，血清中IL-13水平升高的转基因大鼠可模拟出与人类微小病变相似的临床表现和病理改变。 IL-13对MCD和FSGS病人主要受损的靶细胞――足细胞有什么作用呢？本实验对IL-13对足细胞的损伤作用进行了研究，并进一步探讨了其作用机制。 研究内容 足细胞表达IL-13受体的研究 IL-13R mRNA和蛋白表达 IL-13R 相关信号通路STAT研究 IL-13对足细胞的损伤作用 F-actin, ZO-1 IL-13的作用机制 STAT6 MAPK 33℃(+IFN-?) 增殖状态足细胞 温度敏感小鼠足细胞系 37℃(-IFN-?) 分化状态足细胞 SIGMA-ALDRICH 研究内容一:足细胞表达IL-13受体的研究 足细胞存在IL-13受体的mRNA和蛋白质表达 IL-13R?1 IL-4R? Marker IL-4R ? IL-13R ?2 IL-13R ?1 300bp 200bp 100bp Marker IL-4R ? IL-13R ?1 RsaI digest RsaI digest 201bp 96bp JAK-STAT6 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 CON ** IL-13 50ng/ml 10min 20min 30min 60min 研究内容二: IL-13对足细胞的损伤作用 Actin Zo-1 正常培养足细胞的骨架结构和细胞间紧密连接 F-actin ZO-1 50ng/ml 10ng/ml 100ng/ml N IL-13损伤足细胞骨架蛋白F-actin的剂量效应(24h) 24h 6h 12h N IL-13损伤足细胞骨架蛋白F-actin的时间效应(24h) 10ng/ml 50ng/ml 100ng/ml N IL-13破坏足细胞间细胞连接的剂量效应(24h) 8h 12h 24h N 8h IL-13破坏足细胞间细胞连接的时间效应(50ng/ml) 研究内容三: IL-13影响足细胞功能的分子 机制研究 MAPK 信号通路 JAK-STAT 信号通路