（新教材）高中生物人教版选择性必修三课件：4.阶段复习课 .ppt

阶段复习课 知识整合·思维脉图 主题归纳·能力培优 主题一　基因工程的操作程序 【典题示范】 　某种质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,它们的识别序列和黏性末端各不相同,该质粒同时含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。科学家利用此质粒培育转基因抗盐作物,提高粮食种植面积取得重大进展。其培育过程如图所示,请回答下列问题。 (1)在构建重组质粒时,应选用____________两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割,以保证重组质粒序列的唯一性。? (2)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测重组质粒是否导入了土壤农杆菌。 培养基除了含有土壤农杆菌生长繁殖必需的成分和琼脂外,培养基A和培养基B分别还要含有____________、______________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是______________(填数字)菌落中的细菌。? (3)为了确定抗盐作物是否培育成功,要用____________等方法在分子水平进行检测,还要从个体水平用____________________(方法)鉴定作物的耐盐性。? (4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整植株需要用组织培养技术,组织培养技术依据的原理是________________________。? (5)将抗盐基因导入作物细胞内,使作物具有了抗盐性状,这种变异类型属于____________。? 【解析】(1)质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,其中BamHⅠ的切割位点位于目的基因上,用该酶切割会破坏目的基因;若只用SalⅠ一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接;因此在构建重组质粒时,应选用SalⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶对质粒和抗盐基因的DNA进行切割,以保证重组质粒序列的唯一性。 (2)用SalⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶对质粒进行切割时,会破坏四环素抗性基因,但不会破坏氨苄青霉素抗性基因,因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青毒素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基上生存,所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素,含目的基因的是4和6菌落中的细菌。 (3)利用PCR可在分子水平上进行检测,除了从分子水平上进行检测,还可以从个体水平上进行鉴定,即用一定浓度的盐水浇灌作物来鉴定作物的耐盐性。 (4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术,组织培养技术依据的原理是细胞的全能性。 (5)将抗盐基因导入作物细胞内,使作物具有了抗盐性状,这属于基因工程技术,变异类型是基因重组。 答案:(1)SalⅠ、Hind Ⅲ　(2)氨苄青霉素　四环素　4和6　(3)PCR　一定浓度的盐水浇灌作物(将作物移栽到盐碱地中种植)　(4)细胞的全能性　　(5)基因重组 【答题关键】 基因工程的原理和操作程序: 1.基因工程原理:基因重组。 2.操作程序: 【类题精练】 1.(2020·烟台高二检测)某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,下列有关PCR扩增过程相关叙述不正确的是(　　) A.为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的限制性内切核酸酶位点 B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对,而造成引物自连 C.PCR扩增时,复性时温度的设定与引物长度、碱基组成无关 D.如果PCR反应得不到任何扩增产物,则需要降低退火温度或重新设计引物 【解析】选C。构建重组质粒,首先要用限制性内切核酸酶切割含目的基因的DNA片段和质粒,所以位于目的基因两端的引物中需要增加适当的限制性内切核酸酶位点,A正确;设计的引物之间不能有碱基互补配对,否则会导致引物自连,而不能与模板相连,B正确;PCR扩增时,复性时温度的设定与引物长度、碱基组成有关,因为不同长度和碱基组成的引物中氢键数量不同,C错误;PCR反应得不到任何扩增产物,可能是退火温度过高,导致引物与模板不能相连;或引物间相互配对,引物自连,不能与模板相连,可通过降低退火温度或重新设计引物进行改进,D正确。 2.B基因存在于水稻基因组中,仅在体细胞和精子中正常表达,在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响,设计了如下实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因植株。下列关于该实验的叙述,不正确的是 (　　) 注:启动子﹡指可在水稻卵细胞中启动转录的启动子; Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光。 A.B基因在水稻卵细胞中不转录,可能是B基因的启动子在卵细胞中无法启动转录 B.可从水稻体细胞和精子中提取mRNA构建cDNA文库,从中获得B基因中编码