（新教材）高中生物人教版选择性必修三课件：3.4 蛋白质工程的原理和应用 .ppt

【能力提升】(10分钟·30分) 1.(6分)在研究溶菌酶时,科研人员通过蛋白质工程来设计改变酶的构象,得到了多种突变酶,并测得50%的酶发生变性时的温度(Tm),部分结果见下表。有关叙述正确的是 (　　) 酶 半胱氨酸 (Cys)的位置和数目 二硫键 数目 Tm/℃ 野生型T4 溶菌酶 Cys51,Cys97 无 41.9 突变酶C Cys21,Cys143 1 52.9 突变酶F Cys3,Cys9, Cys21,Cys142, Cys164 2 65.5 注:Cys上角的数字表示半胱氨酸在肽链的位置。 A.突变酶的出现是基因突变的结果 B.突变酶F的最适温度为65.5 ℃ C.溶菌酶热稳定性的提高可能与空间结构的改变有关 D.溶菌酶热稳定性的提高,是通过改变半胱氨酸的位置实现的 【解析】选C。由题意知,突变酶是通过蛋白质工程合成的,与基因突变无关,A错误;突变酶F 50%的酶发生变性时的温度是65.5 ℃,B错误;改变溶菌酶的构象,酶变性的温度发生改变,即酶的稳定性改变,因此溶菌酶热稳定性的提高可能与空间结构的改变有关,C正确;溶菌酶热稳定性的提高,是通过增加二硫键的数量实现的,D错误。 2.(6分)(不定项)抗体酶又称催化抗体,是一类免疫球蛋白,其结构如图所示,它既具有相应的免疫活性,又能像酶那样催化某种化学反应。下列有关叙述正确的是 (　　) A.抗体酶与抗原、底物的结合均具有专一性的特点 B.抗体酶可使药物的前体物质在肿瘤组织中水解为活性分子,从而起杀伤作用 C.抗体酶能阻止病毒与靶细胞结合的机理可能是选择性地使病毒外壳蛋白发生水解 D.可通过蛋白质工程对特异抗体的抗原结合位点进行空间改造,使其获得催化功能 【解析】选A、B、C。抗体酶具有典型的酶的特性,即也具有高效性、专一性,A正确;以肿瘤细胞表面抗原的单克隆抗体与酶的交联物以及该酶可以催化的前体药物所组成的这一系统,可以在肿瘤组织局部催化无活性的前体药物,使之成为对肿瘤细胞具有高度杀伤活性的分子,从而在体内对肿瘤细胞发挥选择性杀伤作用,B正确;抗体酶还可有选择地使病毒外壳蛋白的肽键裂解,从而防止病毒与靶细胞结合,C正确;借助基因工程和蛋白质工程将催化基因引入特异抗体的抗原结合位点上,使其获得催化功能,D错误。 【实验·探究】 3.(18分)Hedgehog基因(H)广泛存在于无脊椎动物和脊椎动物中,在胚胎发育中起重要作用。我国科研工作者利用基因敲除和核酸分子杂交技术,研究了H基因在文昌鱼胚胎发育中的作用。 (1)研究者使用了两种TALE蛋白对文昌鱼的H基因进行敲除。TALE蛋白的结构是人工设计的,蛋白质的中央区能够结合H基因上特定的序列,F区则能在该序列处将DNA双链切开如图1所示。 ①根据____________设计出其氨基酸序列,再根据氨基酸序列对应的密码子序列推测岀编码 TALE蛋白的DNA序列,人工合成DNA序列之后,再以其为模板进行转录生成 mRNA。? ②将两种mRNA用__________法导入文昌鱼的卵细胞中,然后滴加精液使卵受精,此受精卵发育成的个体为F0。? ③F0个体细胞内被两种TALE蛋白处理过的DNA,经____________催化重新连接后,H 基因很可能因发生碱基对的____________而丧失功能,基因丧失功能则被称为“敲除”。? ? (2)提取F0胚胎细胞DNA,通过____________体外扩增H基因,用______________进行切割,电泳后用____________为探针进行DNA分子杂交,实验结果如图2所示。图中样品______________代表的F0个体中部分H基因已被敲除。研究者发现,在F0个体产生的所有配子中,通常只有部分配子的H基因被敲除,可能的原因是______________。 【解题关键】准确分析图示并获取图示信息: 图1:被两种TALE蛋白处理过的DNA重新连接后,缺失了BsrGⅠ识别位点。图2:H基因中含有一个BsrGⅠ识别位点,能被BsrGⅠ切割形成两种不同长度的DNA片段,而H基因被敲除后会缺失BsrGⅠ识别位点,不能被BsrGⅠ识别和切割。样品1中有两种长度不同的DNA,说明其代表的个体中H基因没有被敲除,样品2中含有3种长度不同的DNA片段,说明其代表的F0个体中部分H基因已被敲除。 【解析】(1)①蛋白质工程的基本程序:预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因。因此人工设计TALE蛋白时,应该先根据TALE蛋白的功能设计出其氨基酸序列,再根据氨基酸序列对应的密码子(mRNA)序列推测出编码TALE蛋白的DNA序列,人工合成DNA序列之后,再以其为模板进行转录生成mRNA。 ②将两种mRNA导入动物细胞(文昌鱼