【国自然】神经分化各阶段细胞命运决定的调控网络研究及其转化应用.docxVIP

项目称号： 神经分解各阶段细胞命运决议的调控网络研讨及其转化使用 首席科学家： 章小清 同济大学 起止年限： 2012.1至2016.8 依托部分： 上海市科委 教育部 一、要害科学问题及研讨内容 （一）拟处理的要害科学问题 本项目要处理的要害科学问题是：1）多精干细胞分解为神经外胚层细胞并区域化为部位特异性神经前体细胞、以及部位特异性的神经前体细胞终末分解为神经元或胶质细胞的进程是由哪些信号和胞内因子决议的；2）怎么将体外定向分解进程和体内胚胎发育相结合，提醒胚胎发育进程中各神经细胞类型生成的调控网络及分子网络的反常对前期胚胎发育的影响；3）人类神经系统分解发育和小鼠之间存在哪些异同，现有的经过对小鼠研讨取得的常识哪些是适用于人类，以及人类有哪些特征性之处差异于小鼠；4）怎么依据神经分解进程中的决议信号和胞内决议因子树立高效的生成特定类型神经细胞的技能办法，包含程序性分解、去分解和转分解, 并用来医治某些中枢神经系统疾病。详细分解为以下几点： 依据咱们分道扬镳树立的并结合其他试验室树立的多精干细胞高效定向分解办法，将人类ES细胞分解为神经外胚层细胞（Neuroectoderm）和中胚层-内胚层细胞（Meso-endoderm）。另一方面，将神经外胚层细胞继续分解为神经前体细胞（Neuroprogenitor）。横向比较神经外胚层细胞和中胚层-内胚层细胞；纵向比较上游的多精干细胞、神经外胚层细胞和其下流的神经前体细胞，进行基因表达谱分析，然后提炼出神经外胚层细胞特有的信号网络和转录调控网络。隔阂经过调控这些信号网络和转录网络，分析其在神经外胚层细胞分解中的效果；以及是否能够经过调控这些网络进步神经定向分解的功率；或研讨这些信号和转录网络是否能使神经前体细胞或星型胶质细胞去分解为神经外胚层细胞。隔阂结合前期正常胚胎标本，分析体外神经外胚层细胞分解是否和体内发育进程符合；结合神经系统发育反常前期胚胎标本，分析某些分子网络反常是否和前期胚胎发育缺点相关；并经过比较人类和小鼠的神经外胚层分解，分析进化进程中的保存性和特异性。 在Wnt、SHH、BMP、RA等变形素的效果下，将神经外胚层细胞区域化为前脑背侧或腹侧神经前体细胞，脊髓背侧或腹侧神经前体细胞。横向比较各部位特异性的神经前体细胞；纵向比较上游的神经外胚层细胞、神经前体细胞和其下流的神经元或胶质细胞，进行基因表达谱分析，然后提炼出各部位特异神经前体细胞的信号网络和转录调控网络。其间既包含调控区域化部位的胞外胞内信号分子传递，也包含调控神经前体细胞分解发育阶段的胞外胞内信号分子传递。经过调控这些信号网络和转录网络，分析其在神经前体细胞分解中的效果；以及是否能够经过调控这些网络进步神经定向分解的功率；或研讨这些信号和转录网络是否能使不同部位特征的神经前体细胞彼此转化或使胶质细胞去分解为部位特异的神经前体细胞。结合胚胎标本，分析体外神经外胚层区域化机制是否和体内发育进程符合，以及分子网络反常是否和某些神经系统前期发育缺点相关；并经过比较人类和小鼠的神经前体细胞分解进程，分析进化进程中的保存性和特异性。 将前脑腹侧MGE（Medial Gangalia Eminence）神经前体细胞分解为GABA按捺性中心神经元及前脑胆碱能神经元。将脊髓腹侧神经前体细胞分解为脊髓前角胆碱能运动神经元或少突胶质细胞。经过单细胞mRNA-Sequencing分析各细胞类型之间的基因表达谱，提炼神经前体细胞终末分解为特定类型神经细胞的调控信号网络和转录因子网络。分析这些调控网络在不同亚型神经元或在胶质细胞分解中的效果；讨论经过调控这些网络进步特定类型神经细胞分解功率的办法；讨论经过这些调控网络将星型胶质细胞直接编程为GABA按捺性中心神经元、前脑胆碱能神经元、脊髓前角胆碱能运动神经元或少突胶质细胞的办法。相同结合胚胎标本，分析这些体外神经分解进程中的调控机制是否和体内发育进程符合及其与某些前期胚胎发育缺点的相关；并经过比较人类和小鼠的神经生成或胶质生成进程，分析进化进程中的保存性和特异性。 研讨怎么依据神经分解各阶段细胞命运决议的分子调控网络，经过高效的神经定向分解办法，或经过将星型胶质细胞直接重编程的办法，得到GABA按捺性中心神经元、前脑胆碱能神经元、脊髓前角胆碱能运动神经元或少突胶质细胞。体外研讨这些神经元和胶质细胞的生化特性、电生理特性、及功用活性，包含其调控下流靶细胞的才能。将少突胶质细胞移植入Shiverer/SCID小鼠侧脑室，观测其构成髓鞘的才能。将前脑胆碱能神经元移植入学习回忆缺点的小鼠海马，观测其对学习回忆改进的状况并对其进行生理测验。依据人类和小鼠在神经定向分解进程中的异同，使用保存的调控网络测验将海马星型胶质细胞体内原位直接重编程为前脑胆碱能神经元，观测小鼠学习回忆改进的状况。 答复