【国自然】人类重要传染病病原体耐药机制的基础研究.docxVIP

项目名称： 人类重要盛行症病原体耐药机制的根底研讨 首席科学家： 王明贵 复旦大学 起止年限： 依托部分： 教育部 一、研讨内容 拟处理的科学问题： 鉴于我国在严峻盛行症的分子传达规则、耐药发生机制研讨上的滞后，本课题所要处理的要害科学问题是：树立系统的耐药病原体分子监测网络与完好的反映我国耐药状况的耐药基因谱，系统地了解新耐药基因或耐药位点的发生与演化规则，清晰首要耐药机制，取得医治重要盛行症耐药的新途径。 树立系统的耐药病原体分子监测网络与完好的反映我国耐药状况的耐药基因谱：分子盛行病学作为一种新的研讨办法研讨盛行症病原体的传达规则，在西方发达国家分道扬镳广泛运用，并分道扬镳取得很好的效果。可是病原体盛行病学的传达规则因地而异，国外的研讨效果不能彻底适用于我国，解说我国的盛行症病原体及其耐药性的盛行状况，更不或许用于辅导我国盛行症及其病原体耐药性的防治作业。因而，树立我国耐药菌的分子耐药监测渠道，应运用现代分子盛行病学的手法，研讨我国耐药病原体的发生机制与传达规则，在此根底上树立耐药传达的预警机制与操控战略。 系统地了解新耐药基因或耐药位点的发生与演化规则，清晰首要耐药机制： ①细菌方面，偏重研讨近年来新呈现的严峻的铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药的构成机制，近年来新发现的大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药的质粒介导耐药机制、ESBL编码基因的来历及传达机制，这些内容在崇高上均没有进行深化研讨。②我国耐药结核分枝杆菌新耐药基因变异位点研讨，对新耐药机制进行深化的研讨，辅导我国耐药结核分枝杆菌感染的确诊与防治。在上述分子盛行病学及耐药机制研讨的根底上，运用分子生物学信息技能，直接从临床标本中检测细菌及结核分枝杆菌，隔阂检测其耐药性。大大缩短病原体及其耐药性的病原确诊时刻，辅导临床及时、有用地选用药物。③HBV耐药机制的研讨包含HBV对核苷类耐药规则、宿首要素对医治效果的影响及HBV新骤变株生物学特性的研讨，树立牢靠的HBV体外监测系统。④HIV耐药基因骤变与耐药特性间的定性和定量联络，耐药的生物学特性，为树立运用高灵敏度、高通量的基因型测定精确猜测耐药特性供给依据，隔阂对立HIV靶位－HIV逆转录酶结构和功用的进行研讨。3. 取得医治重要盛行症耐药的新途径：耐药病原体感染的医治办法有限、病死率高，经过耐药真菌新药靶的挑选及新式药物的挑选、抗菌药物防骤变浓度研讨、抗病毒药联合抗HBV等研讨，探寻抵挡耐药病原体的新途径。展开耐药HIV病毒与相关细胞因子偏重的结构生物学研讨，以偏重病毒分子变异才干以外的机制包含细胞靶位的新道路处理HIV耐药的新途径。本研讨的终究方针为阻挠或推迟盛行症病原体耐药性的发生及传达，有用医治耐药病原体的感染，进步盛行症的治愈率，增进人类健康水平。这也是本研讨要处理的最根本问题。首要研讨内容：本研讨项目包含重要盛行症的5种首要病原体：细菌、结核分枝杆菌、人类免疫缺点病毒、乙型肝炎病毒及白色念珠菌。各病原体的研讨内容包含耐药性的分子盛行病学、耐药性的构成及传达机制（包含新耐药基因的研讨）、耐药菌的快速确诊、耐药菌感染的防备与医治新途径等方面。1．细菌耐药机制及耐药性防治（1）多重耐药铜绿假单胞菌的耐药机制经过对碳青霉烯酶、膜通透性改动及自动外排机制3方面的较全面的研讨，清晰多重耐药铜绿假单胞菌的耐药机制。国内近年研讨发现在铜绿假单胞菌中存在一种能水解亚胺培南但活性又能被氯唑西林按捺的酶（类似于AmpC酶但水解底物概括扩展包含了碳青霉烯类抗生素），因而极或许存在新的碳青霉烯酶及其它耐药机制隔阂参加，计划对具新特性的β内酰胺酶进行进一步的研讨，预期会有新的发现。（2）大肠埃希菌耐药机制研讨1）大肠埃希菌对喹诺酮类的质粒介导耐药机制研讨：计划对大肠埃希菌对喹诺酮类的质粒介导耐药机制进行深化研讨，研讨内容包含：①质粒介导耐药基因qnrA及qnrB分子盛行状况，清晰质粒介导耐药机制在喹诺酮类耐药性构成中的效果。②耐药机制研讨：qnr产品Qnr蛋白对喹诺酮效果靶位的维护效果、Qnr效果位点和Qnr蛋白的模建及晶体结构的研讨，清晰耐药的构成机制。2）大肠埃希菌等革兰阴性杆菌CTX－M型ESBLs的传达机制及传达规则：计划在原有根底上作进一步深化的研讨，研讨CTX－M编码基因的来历及其传达规则，然后有利于耐药菌的操控。（3）树立耐药菌快速基因确诊办法选用分子生物信息学技能，研讨病原菌的基因组序列或特征性基因序列和耐药基因序列，方针是树立多重DNA引物的反响形式，在辨别革兰阳性和革兰阴性菌的首要菌种的隔阂，测定耐药谱。选用分子生物学办法直接从人体体液或相关标本中检测细菌的特异性DNA，然后树立快速、精确的病原菌确诊办法。（4）树立常用抗菌药医治各种重要病原菌的“防骤变浓度”规模经过树立体外模型测定常用各类抗菌药