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实验一 质粒DNA的提取及检测; 质 粒（plasmid）;精品资料;
你怎么称呼老师？
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？
你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？
教师的教鞭
“不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”;常用的质粒载体;质粒提取的思路;第一部分 质粒DNA的提取;一．目的;二．原理;☆原理示意图 返回目录 返回原理;三、实验仪器、材料与试剂 ;溶液 I;???液 II;溶液 III;TE(pH8.0);特点：小量质粒制备、最简便、快捷
应用：质粒酶切鉴定、克隆（粗提）
测序、转染（细提）; 四、实验步骤;?
加入150uL溶液III（轻轻混匀），冰上静置15min质粒DNA复性
?
12000rpm，离心15min，取上清记录体积到一新管
?
上清加等体积的酚：氯仿（振荡混匀）
?
12000rpm，离心15min，取上清记录体积到一新管
?;上清加2倍体积的无水乙醇（充分混匀），冰浴 30min
?
12000rpm，离心15min
?
沉淀用75%乙醇1mL洗涤两次（轻弹混匀、离心）
?
12000rpm，离心10min
?
晾干沉淀
?
沉淀用20ul TE溶解;吸附管用BL 500ul平衡
?
取上清加入吸附管
?
5000rpm 离心5min
?
加PW漂洗液500ul，放置2min
?
10000rpm 离心5min，晾干
?
加30ul TE，10000rpm 离心5min（收集到干净的EP管中）;第二部分 琼脂糖凝胶电泳; 相关知识;琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 ;核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系 ;影响迁移率的因素;一、实验目的 ;二、实验原理 ;质粒的电泳;三、仪器、材料与试剂 ;四．操作步骤;五、实验结果与讨论;图1的电泳结果不是很好，一方面上样量太大不同构象的质粒分子没有分开；另一方面有些样品RNA去除得不好，在电泳结果上可以看到大团的荧光；此外还要注意上样的技巧，上样后稍沉降一会，使样品均匀地分布于上样孔的底部再开始电泳，这样走出的条带会较均匀。图2的结果较好。
;六．注意事项
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