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第 3 章 核酸的结构和功能 DNA 结构域： 组蛋白： 是真核生物体细胞染色质中的碱性蛋白质， 富含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸： H1、H2A 、 H2B 、 H3 和 H4 。 核小体：是构成真核生物染色质的基本结构单位。 核基质：为真核细胞核内的网架结构。 30nm 纤丝：核小体进行高度有序的组装，形成左手螺旋的螺线管。每个螺旋约 6 个核小体。 H1 组蛋白的功能：ⅰ稳定作用；ⅱ保护 DNA 免受核酸酶降解。 1、 DNA 双螺旋结构有哪些形式？说明其主要特点和区别。 A 型、 B 型及 Z 型螺旋； A 型螺旋比较粗短，碱基倾角大，大沟深度明显超过小沟； B 型比较适中； Z 型 细长，大沟平坦，核苷酸构象顺反相间，螺旋骨架呈 Z 字形。 2、什么是 DNA 的拓扑异构体，它们之间的相互转变依赖于什么？ 一级结构相同 （序列相同）而 L 值不同的环形 DNA 分子称为拓扑异构体， 它们之间的相互转变依赖于 DNA 的拓扑异构酶。 3、简述真核生物染色体的组成，它们是如何组装的？ 细胞核内由 DNA 、组蛋白、非组蛋白及少量 RNA 组成的线性复合结构。 DNA-- 核小体 --30nm 纤丝 -- 核基质固定 --压缩 -- 染色体 4、简述细胞内 RNA 的结构特点以及与 DNA 的区别。 P57 5、引起 DNA 变性的主要因素有哪些？核酸变性后分子结构和性质发生了哪些变化？ 1）加热； 2 ）极端 pH 值； 3）有机溶剂、尿素和酰胺等。 DNA 双螺旋解链。性质变化： DNA 溶液的黏度 大大下降、沉降速度增加、浮力密度上升、紫外吸收光谱升高、酸碱滴定曲线改变、生物活性丧失。 6、检测核酸变性的定性和定量方法是什么？具体参数如何？ 紫外吸收光谱的变化。 以 50 μg/ml DNA 溶液在 A 260 下测定，三者的 A 260 数值为： 双链 DNA A 260=1.00；单 链 DNA=1.37 ；游离碱基、核苷酸 =1.6 。（结构越有序，吸收光越少） 7、 DNA 的 T m 值一般与什么因素有关？ Tm=4 （G+C ）+2 （A+T ） 1）DNA 的均一性（均质较小） ；2 ）G-C 碱基对的含量； 3）介质中离子强度。 （较低则 Tm 较低而范围宽） 8、写出 DNA 复性必须满足的两个条件。影响 DNA 复性速度的因素包括哪些？ （1 ）一定的离子浓度： 0.15-0.50mol/L ，NaCl ；（2）一定的温度：通常小于 Tm 值 20-25℃，也称退火温度。 （1 ）DNA 的复杂度； （2 ）DNA 的浓度； （3） DNA 片断大小； （4 ）退火时间； （5 ）阳离子浓度。 9、画出原核生物 DNA 复性对浓度的 C t 曲线图。 0 10、 DNA 复性实验的标准条件是什么？复性程度怎样检测？ 1）测定减色效应； 2 ）测定 S1核酸酶水解 DNA 的量； 3）羟基磷灰石柱层析。 11、简述 DNA 分子的高级结构。 单链核酸形成的二级结构： 病毒基因组的单链 DNA 和 RNA 可以通过链间的碱基互补形成二级结构，主要有发夹（ hairpin) 结 构和突出环 (bulge loop) 结构 反向重复序列 ： 反向重复序列（ inverted repeat) 又称回文序列（书图 3.6 ），如： 5’- GGTACC- 3’ 3’-CCATGG- 5’ 5’-AATTCC TGCGAT ACTC ATCGCA CCGGAA- 3’ 3’-TTAAGG ACGCTA TGAG TAGCGT GGCCTT- 5’ 回文序列为单链时形成发夹结构；回文序列为双链时，形成十字架结构。 三股螺旋的 DNA: 当 DNA 的一段多聚嘧啶核苷酸或多聚嘌呤核苷酸序列镜像重复 (mirror repeat) 时，即可回 折产生 H-DNA,