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实训 实训 实训 实训:中药何首乌中二苯乙烯苷的 含量测定(HPLC法) 制作单位:沧州医学高等专科学校 (一)掌握中药有效成分的HPLC法测定方法及一般操作规程。 (二)熟悉高效液相色谱仪的使用方法及其操作注意点。 实训十六 一、目的要求 (一)仪器:高效液相色谱仪、容量瓶、具塞锥形瓶、移液管、电子分析天平、球形冷凝管、电热套。 (二)试药:何首乌、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷对照品、乙腈、稀乙醇。 二、仪器与试药 三、实验内容 (一)色谱条件与系统适用性试验: 避光操作。照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈一水(25:75)为流动相;检测波长为320nm。理论板数按2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷峰计算应不低于2000。 三、实验内容 (二)对照品溶液的制备: 取2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液,即得。 三、实验内容 (三)供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇25m1,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,静置,上清液滤过,取续滤液,即得。 三、实验内容 (四)测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。 注:本品按干燥品计算,含2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷(C20H22O9)不得少于1.0%。 谢 谢 / THANKS 制作人:吴爽 实训 实训 实训
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