生物化学：第三章 酶 (2).ppt

第三章 酶 第三章 酶 概 述 酶的研究历史 第一节 酶的概念及作用特点 第二节　酶的命名及分类 第三节 酶的作用机理 第四节 酶促反应的动力学 第五节 别构酶 同工酶 共价修饰酶 酶原 核酶 抗 体酶 诱导酶 第六节 酶的分离纯化 第七节 酶工程简介 第八节 维生素和辅酶 概述：酶的研究历史 公元前两千多年，我国已有酿酒记载。 一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。 酶的发现和提出：1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母汁成功实现了发酵。提出了发酵与活细胞无关，而与细胞液中的酶有关。获1911年诺贝尔化学奖 1913年，Michaelis和Menten提出了酶促动力学原理—米氏学说。 1926年，Sumner从刀豆种子中分离、纯化得到了脲酶结晶，首次证明酶是具有催化活性的蛋白质。获1949年诺贝尔化学奖 1982年，Cech对四膜虫的研究中发现RNA具有催化作用—核酶（获得1989年诺贝尔化学奖）。 抗体酶发现、ATP合酶分解与合成ATP的机制(获1997年诺贝尔化学奖)等。 1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。 第一节 酶的概念及作用特点 一、酶（Enzyme）的概念 酶是活细胞产生的一类具有催化功能的生物分子，所以又称为生物催化剂Biocatalysts。 酶催化的生物化学反应，称为酶促反应Enzymatic reaction。 在酶的催化下发生化学变化的物质，称为底物substrate。 四膜虫rRNA成熟中的剪接 二、酶的作用特点 （一）酶和一般催化剂的共性 用量少而催化效率高； 它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学反应平衡。酶本身在反应前后也不发生变化。 酶能够稳定底物形成的过渡状态，降低反应的活化能，从而加速反应的进行。 （二）酶作为生物催化剂的特性 酶的催化作用可使反应速度提高10７ –101３倍。 例如：过氧化氢分解 2H2O2 ? 2H2O + O2 用Fe3+ 催化，效率为6X10-4 mol/mol.S，而用过氧化氢酶催化，效率为6X106 mol/mol.S。 转换数（turnover number）的概念：每秒钟每个酶分子能催化底物发生变化的微摩尔数，用kcat表示（ ?mol/S ）。 ?-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65?C条件下可催化2吨淀粉水解。 2．专一性 Specificity 酶的专一性 Specificity又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质。亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应。 　例如：蛋白酶催化蛋白质的水解；淀粉酶催化淀粉的水解；核酸酶催化核酸的水解。 3．反应条件温和 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。 ４．酶易失活 凡能使蛋白质变性的因素如强酸、强碱高温等条件都能使酶破坏而完全失去活性。所以酶作用一般都要求比较温和的条件如常温、常压和接近中性的酸硷度。 ５.酶活力可调节控制 如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活及激素控制等。 （二）酶作为生物催化剂的特性 高效性 专一性 反应条件温和 酶易失活 酶活力可调节控制 某些酶催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关。 三、酶的底物专一性 　酶的底物专一性即特异性（substrate specificity）指酶对它所作用的底物有严格的选择性。一种酶只能作用于某一种或某一类结构性质相似的物质。 　酶的底物专一性类型： 　结构专一性 立体化学专一性。 １. 结构专一性 有些酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的底物。这种专一性称为绝对专一性（Absolute specificity)。 例如：脲酶、麦芽糖酶、碳酸酐酶及延胡索酸水化酶（只作用于反丁烯二酸）等。 （２）相对专一性(Relative Specificity) 　有些酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或一类化学键。这种专一性称为相对专一性(Relative Specificity)。包括： 族(group)专一性（对键两端的基团要求的程度不同，只对其中一个基团要求严格）。如?-葡萄糖苷酶，催化由?-葡萄糖所构成的糖苷水解，但对于糖苷的另一端没有严格要求。胰蛋白酶，水解硷性氨基酸的羧基形成的肽键。 键(Bond)专一性。如酯酶催化酯的水解，对于酯两端的基团没有严格的要求。 ２. 立体化学（异构）专一性Stereochemical Specificity，stereospecificity 酶的一