生物化学：第三章 酶.ppt

非专一性不可逆抑制剂 有机磷化合物—与酶活性直接有关的丝氨酸上的-OH牢固地结合，从而抑制某些蛋白酶或酯酶。（DFP、敌百虫、敌敌畏、农药1605等，） 有机汞、有机砷化合物—与酶蛋白上的-SH作用，从而抑制含-SH酶的活性。（对氯汞苯甲酸） 氰化物、硫化物、CO—与含铁卟啉的酶（细胞色素氧化酶）中的Fe3+结合，使酶失活。 重金属—能使大多数酶失活，加入EDTA可以除去。 烷化剂—使酶蛋白中的 –SH、-NH2、-OH等发生烷基化， 失活（碘乙酸、碘乙酰胺等）。 青霉素—抗菌素类药物，与糖肽转肽酶活性部位Ser-OH共价结合（与细菌的细胞壁合成有关），使酶失活。 b. 可逆抑制作用(reversible inhibition) 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与酶结合的情况，又可以分为三类 b1竟争性抑制(competitive inhibition) 某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竟争与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。 加入竞争性抑制剂后，Km 变大，酶促最大反应速度不变。 竟争性抑制作用的例子： 在可逆抑制剂中最重要的是竞争性抑制剂。如：磺胺药、氨基叶酸等。用增加底物浓度的方法可以减弱抑制作用。 磺胺药物的作用机制： b2 非竟争性抑制(noncompetitive inhibition ) 酶可同时与底物及抑制剂结合，即底物和抑制剂没有竞争作用。酶与抑制剂结合后，还可与底物结合；酶与底物结合后，也可再结合抑制剂，但是三元的中间产物不能进一步分解为产物，所以酶活性降低。 非竞争性抑制的动力学 加入非竞争性抑制剂后，Km 不变，而Vmax减小。 b3 反竞争性抑制(uncompetitive inhibition ) 酶只有与底物结合后才与抑制剂结合，从而导致酶活性下降。这类抑制作用最不重要。 反竞争性抑制的动力学 可逆抑制的动力学比较 无抑制剂 Vmax Km 竞争性抑制作用 不变 变大 非竞争性抑制作用 变小 不变 反竞争性抑制作用 变小 变小 第五节 几种重要的调节酶 一、别构酶（allosteric enzyme）： （一）别构酶的概念和基本性质 别构酶也称变构酶，它是代谢过程中的关键酶。通过效应物（调节物）和酶的别构中心的结合来调节其活性，从而调节酶反应速度和代谢过程。别构酶的基本结构特性： 1.有多个亚基 2.有四级结构 3.酶分子中除了有结合底物并催化反应的活性中心外，还有可以结合调节物的别构中心。活性中心和别构中心可能位于不同的亚基或相同的亚基的不同部位。 几个相关概念 别构效应（allosteric effect）：调节物或效应物与酶分子上的别构中心结合后，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活性中心对底物的结合和催化作用受到影响，从而调节酶反应速度及代谢过程，此效应即为酶的别构效应。 提高酶活性的别构效应称变构激活（ allosteric activation ）或正协同效应（positive cooperative effect） 降低酶活性的别构效应称变构抑制（ allosteric inhibition ）或负协同效应（negative cooperative effect） 具有别构效应的酶叫别构酶，使别构酶产生别构效应的物质叫效应物（变构激活剂和变构抑制剂） 同促效应（同种协同效应）（homotropic effect）上述协同如果发生于底物之间，即效应物就是S，酶分子上有多个活性中心，先与酶活性中心结合的底物分子，对后续底物与酶分子其它活性中心的结合产生影响； 异促效应（heterotropic effect）：如果发生在效应物与底物之间。 多数别构酶兼有同促效应和异促效应。 （二）别构酶的动力学及别构酶对酶反应速度的调节 1.大多数别构酶具有正协同效应（酶分子结合一分子底物或效应物后，酶的构象发生变化，这种新的构象有利于后续分子与酶的结合，大大促进后续分子与酶的亲合性），其初速度与底物浓度的关系呈S形的v-[S]曲线。 2.另一类别构酶具有负协同效应，其动力学曲线在表现上与双曲线相似，但意义不同 ? （三）别构酶调节酶活性的机理 齐变模型 1965Monod,Wyman,Cha