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【 doc】两种血小板稀释液溶解红细胞的机理探讨 两种血小板稀释液溶解红细胞的机理探讨 江西医学检验 2005 年 4 月第 23 卷第 2 期 两种血小板稀释液溶解红细胞的机理探讨 邵平扬郑优真 中图分类号 R446.111,11331.1 ”43,11331.1 ”41 文献标识码 A 文章编号 1008-0023(2005)02 — 0135— 03 b5E2RGbCAP ? 学术探讨 ? 【摘要 1 目的探讨复方尿素稀释液和草酸铵稀释液溶解红细胞的机理 . 方法用含 10%尿素和 l%草酸铵的 不同浓度氯化钠溶液作红细胞脆性试验 ; 用自动生化分析仪测定不同压积红细胞浓度与 NH.. 的关系 ; 用生理盐 水, 复方尿素稀释液和草酸铵稀释液计数富血小板血浆 (PRP)ltl1.d ’, 板数 . 结果尿素在红细胞膜两侧不形成有 效渗透浓度 , 复方尿素稀释液对红细胞而言为一个低渗溶液 ( 有效渗透浓度 50mOsm/L);草 酸铵稀释液的 NH.. 能 p1EanqFDPw 主动转运到红细胞内 . 形成细胞内高渗而造成红细胞破坏 ; 两种稀释液对血小板有相同的影响 . 即使血小板体积 增大 . 结论复方尿素稀释液中尿素无破坏红细胞作用 , 溶解红细胞主要是溶液的低渗性 : 草酸铵稀释液溶解红 细胞与红细胞膜对 NH4”主动转运有关 : 两种稀释液对血小板计数无影响 . 【关键词 1 复方尿素稀释液 ; 草酸铵稀释液 ; 血小板复方尿素稀释液和草酸铵稀释液是临床检验常 用的两种血小板稀释液 . 其检测结果有一定差异 . 造成这种差异的原因 . 可能是稀释液在破坏红细胞的同时 , 对血小板有一定的影响 . 这两种稀释液是如何溶解红细胞的未见文献有明确的论述 . 为此我们于 2oo3 年 3 月 2003 年 7 月对这两种稀释液溶解红细胞的机理作了探讨 . 并观察了它们对血小板计数的影响 . 报道如下 . 材料与方法 1.1 标本患者组 35 例均来自本院 2003 年 3 月 2003 年 7 月的住院及门诊血小板减少患者 . 包 1/10 括血小板减少性紫癜 , 脾亢 , 白血病等 . 其中男性 34 例, 女性 31 例. 年龄 8.25 岁; 对照组 30 例来自于健康体检者 , 其中男性 16 例. 女性 14 例 . 年龄 22—45 岁. 1.2 试剂 1.2.1 复方尿素稀释液和草酸铵稀释液均按全国 临床检验操作规程【 - 要求配制 . 1.2.2 血氨试剂盒 . 由英国 RANDOX公司提供 . 1.3 仪器 1.3.1Erma 折射仪 . 辽宁无线电七厂组装 . 1.3.2HITACHI7170 自动生化分析仪 . 日本 HI. TACHI株式会社产品 . 1.4 方法 1.4.1 配制 3 组 109.4,102.6,95.8,88.9,82.1, 75.2,68.4,61.6,54.7,47.9,41.0(mmol/L) 氯化钠溶 液. 其中两组分别含有 10%尿素和 1%草酸铵 . 另一作者单位 :314000 浙江省嘉兴市第一医院检验科 作者简介 : 邵平扬 .1967 年 8 月生 . 主管技师 , 毕业于浙江大学医学院 . 主要从事骨髓细胞形态学和流式细胞术检测 . 组作对照组 . 用 Erma折射仪测定各管的渗透压 . 然后每管各取 lm1. 分别加入肝素抗凝的正常人静脉 血 0.05ml, 室温静置 60min, 观察溶血情况 , 结果判断参照红细胞盐水渗透脆性试验 Iu. 1.4.2 配制 2001~moI/L 氯化铵等渗溶液 . 其中含氯化铵 200p,mol/L. 氯化钠 9g/L. 每管 400pA,分别加入 0,50,100,200,400 压积红细胞 , 压积红细胞浓度分别为 0%,11%,20%,33%.50%,放置 10 分 钟. 离心取上清液 , 用 HITACHI7170自动生化分析仪测定 NH:浓度 , 重复测定三次 . 取其均值 . 测定 方法按血氨试剂盒说明书 . 为了排除红细胞对 NI- h” 测定的影响 . 同时用生理盐水代替氯化铵等渗溶液 作对照 . 1.4_3 取血小板减少患者 EDTA—K2 抗凝血 2ml. 离心 . 分离富血小板血浆 (PRP). 分别用复方尿素稀 释液 , 草酸铵稀释液和生理盐水计数 PRP血小板 数. 结果 2.1 含有 10%尿素及 1%草酸铵的不同浓度氯化 2/10 钠溶液对红细胞的溶解作用见表 1. 2.2 不同红细胞压积浓度与其孵育上清液 NI-h+ 浓度的关系见图 1 孵育上清液 NH.+的浓度与压积红细胞浓度呈 明显负相关 (r== 一 0.9867). 2_3 复方尿素及草酸铵稀释液对血小板