园林植物组织培养 (1).pdf

园艺植物生物技术 Horticultural plant biotechnology 第10章 植物基因工程基础 Main contents 植物遗传物质基础知识 植物基因工程常用工具酶 植物基因工程常用载体 植物基因工程基本技术 基因工程 （genetic engineering) 外源基因经体外重组后导入受体细胞内，并在受体细胞内 复制、转录、翻译、表达的系列操作 主要内容： 基因组学 表达载体构建 基因表达调控 转基因技术 基因分离克隆 表达产物纯化与活性分析… 第一节 植物遗传物质基础知识 DNA结构与功能 RNA结构与功能 蛋白质结构与功能 遗传信息传递 基因概念 核酸 （nucleic acid ） 以核苷酸为基本组成单位的生物大分子 遗传信息的物质载体 类型：  脱氧核糖核酸 （deoxyribonucleic acid ，DNA ）  核糖核酸 （ribonucleic acid ，RNA ） 1. DNA结构与功能 1.1 DNA一级结构与功能 DNA分子中4种脱氧核苷酸 （dAMP、dGMP、dCMP、 dTMP）排列顺序 连接方式：一核苷酸的5’端磷酸根（PO33- ）与下一核苷 酸的3’端的羟基（-OH）形成3, 5’-磷酸二酯键 功能：贮存生物遗传信息 1.2 DNA二级结构与功能 双螺旋结构（B-DNA ），Watson和Crick Right handed B-form DNA Double helix Model 每一单链具5’- 3’极性, 两单链间以氢键连接，极性相反，反向平行以中心 为轴，向右盘旋, 双螺旋中存在 大沟 (2. 2nm)、小 沟 (1. 2nm) 影响双螺旋结构稳定性的因素 碱基堆积的棒状实体 l 氢键 l 碱基堆积力 (非特异性结合力) l 静电斥力 L碱基分子内能 1.3 DNA三级结构与功能  DNA双螺旋进一步扭结折叠形成更加复杂结构  只在封闭的环形结构中出现 类型  负超螺旋：DNA与轴的缠绕方向和右手螺旋方向相反  正超螺旋：DNA与轴的缠绕方向和右手螺旋方向相同 功能  使松弛性DNA更紧密 ，体积更小 ，在生命活动中更稳定  影响DNA双螺旋的解链过程，从而影响与酶蛋白结合 2. RNA结构与功能 2.1 信使RNA（mRNA） 结构 碱基组成与DNA相似，U代替T  结构特点：真核5’末端具有甲基化的鸟苷酸残基帽子 3’ 端具有poly A尾巴 ；原核mRNA无两结构 功能 直接指导蛋白质合成  5’端帽子：防止mRNA降解；mRNA与核糖体结合的信