第九章发酵工程下游技术发展及发酵液预处理.pptVIP

第九章发酵工程下游技术发展及发酵液预处理 （四）高价无机离子的去除方法 钙离子，可用草酸。 镁离子，可用三聚磷酸钠它和镁离子形成可溶性络合物，用磷酸盐处理，也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。此法可用于环丝氨酸的提取。 铁离子，可加入黄血盐，使形成普鲁士蓝沉淀。 （五）杂蛋白质的去除方法 热变性 沉淀 大幅度改变pH 四、发酵液的过滤 微生物发酵液中含有大量菌体、细胞或细胞碎片以及残余的固体培养基成分。过滤就是将悬浮在发酵液中的固体颗粒与液体进行分离的过程。 在过滤操作中，要求滤速快，滤液澄清并且有高的收率。 第九章发酵工程下游技术发展及发酵液预处理 第九章 发酵工程下游技术发展及发酵液的预处理 下游技术（工程） ：对于由生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应等各种生物工业生产过程获得的生物原料，经提取分离、加工并精制目的成分，最终使其成为产品的技术。 概述 下游加工过程的重要性。（组成、费用和关注程度） 1.组成：下游加工过程是生物技术的重要组成部分，发酵液或反应液需要经过下游加工过程才能成为成品； 2.费用：传统发酵工业中下游部分的费用占整个工厂投资费用的60％，而对重组DNA生产蛋白质等基因工程产品，下游加工的费用可占整个生产费用的80％－90％； 3.关注程度：英国政府工业部于1983年发起生物分离计划（BIOSEP），专门研究下游加工过程；1987年英国化学工业会召开了专门讨论下游加工过程的国际会议；我国也于1989年在济南召开了一次专门会议；近十年来国内外有关生物分离或蛋白质纯化的专著陆续出版。 第一节 发酵工程下游技术发展 一、发酵产物的分类 从工业发酵范畴来看，从发酵液中获得的发酵产物大致可分为三类 ： 1、菌体： 2、酶： 3、代谢产物 二、下游加工技术的特点 1.发酵液的复杂性造成分离上的困难性。 粗原料中带入大量的不参与发酵过程的可溶性杂质和不溶性悬浮物，给下游过程的分离提取带来了不小的困难，增加了下游操作成本，包括发酵废液的处理成本  2. 欲提取的产物通常浓度低且很不稳定。一些新兴生物技术产品，待处理物料中产品浓度很低，往往低于杂质含量，如L—异亮氨酸为％，青霉素为％，每千克产品中核黄素仅含几克、胰岛素仅含几十毫克，而且对热、PH、有些甚至对光不稳定。 生物活性物质的活性还易受温度、pH、金属离子、无机盐浓度、有机溶媒等环境因素的影响。制约了下游技术的可选范围。 3. 多为分批操作，各批发酵液不尽相同，要求下游加工有一定弹性。 四、生物工业下游技术的发展历程 2. 纯培养阶段 古代酿造业包括酿酒、制酱（油）、醋、酸奶和干酪等。技术原始、家庭式作坊、产物基本不经过后处理而直接使用，无下游技术。 主要指1860－1930。发现了发酵的本质是微生物的作用，掌握了纯种培养技术，生物技术进入近代酿造产业的发展阶段。逐渐开发形成了发酵法生产酒精、丙酮、丁醇等微生物发酵工业（厌氧发酵），其产品相对简单，基本上是无活性的小分子。此时开始引入过滤、蒸馏、精馏等近代分离技术。 1.古代酿造业 以20世纪40年代出现的青霉素产品为代表。 无菌空气制备技术、大型好氧发酵装置开发，一大批通风发酵技术产品相继投入了工业生产，如抗生素（链霉素）、氨基酸（谷氨酸）、有机酸（核酸、柠檬酸）、酶制剂（淀粉酶）、微生物多糖和单细胞蛋白等。产品多样性决定了分离方法的多样性。借鉴和引进吸收了大量的近代化学工业的分离技术，如沉淀、离子交换、萃取、结晶等。 3. 液体深层发酵阶段 以20世纪70年代末崛起的DNA重组技术及细胞融合技术为代表。 生物技术在其主要领域：基因工程、酶工程、细胞工程和发酵工程取得了长足进步，一批高附加值的产品开始面世，如乙肝疫苗、干扰素、功能因子、低聚糖、活性肽、高度不饱和脂肪酸等。生物技术在深度和广度上都取得了很大的进展。很多企业开始加强在生物工业下游技术领域的研究开发力量，不断推出新技术、新产品、新装备，以抢占更多的市场。新技术有超临界CO2萃取技术、膜过滤、渗透蒸发技术、各种色谱（层析）技术等。 4. 现代生物技术阶段 20世纪80年代以来，生物工业下游技术进步很快，出现了很多新概念、新技术、新产品和新装备。大致可分为以下几大类： （1）固液分离技术 絮凝技术引入到发酵液的预处理上，研究开发了菌体及悬浮物絮凝技术，改善了发酵液的分离性能，加之纤维素助滤剂的开发，大大提高了发酵液的固液分离效率。在固液分离机械方面，也出现了一些性能优良的新型机械，如带式过滤机、板框过滤机、螺旋沉降式离心机等。微滤膜可高效分离细微的悬浮粒子。 已开发出珠磨破碎、高压匀浆法、 X-press法和化学破碎等技术。该技术的成熟使得胞内代谢产物的大规模工业化生产成为可能。 （2）细胞破碎技术 主