分子诊断学：临床分子生物学检验质量控制.pptVIP

仪器设备 功能检查及校准方法 固定校准频度 其他需要校准的情况 扩增仪 仪器校准实验 当仪器移动时 实验失败 热电偶探针检测温度 每月一次 靶温度或温度差异超出允许范围 扩增功能检测温度均一性 每四个月一次 待测孔未出现扩增 移液器 重新测量法校准 每年2次 不符合要求时 水浴箱/金属浴 温度检测 每次实验 不符合要求时 酶标仪 预防性维护及校准 每年2次 不符合要求时 天平 砝码校准 每年1次 不符合要求时 表2 临床分子生物实验室主要仪器的功能检查及校准 仪器的功能检查及校准 全过程质量控制 第六节 分析中质量控制 分析前质量控制 分析后质量控制 全过程质量控制 质量控制 全过程质量控制 分析前质量控制 2 3 4 实验室环境条件符合要求 仪器设备处于良好的工作状态 实验室工作人员具有上岗证 试剂和耗材的质量符合要求 5 6 具有完整、可操作性的SOP 合理选择检验项目，患者信息齐全 7 临床标本的采集、运送和保存符合要求 1 8 按SOP文件对实验室进行清洁、化学清污和扩增产物修饰等 分析前质量控制 分析前质量控制 2 3 4 标本量太少 标本类型不一致 溶血 脂血 5 6 容器破损 标本采集管用错 7 抗凝标本有凝块 1 分析中质量控制（一） 分析中质量控制—标本处理 不合格标本 标本性状评价 溶血 脂血 黄疸 核酸提取评价 核酸浓度检测 核酸纯度检测 核酸完整性检测 抑制物或干扰物质控 竞争性内标 非竞争性内标 核酸提取与扩增有效性质控 弱阳性质控品 阴性质控品 标题 DNA文库质控 DNA文库片段大小 DNA文库浓度 核酸的提取、纯化、扩增及DNA文库的构建 分析中质量控制（二） 分析前质量控制 2 3 4 阳性质控品 阴性质控品 试剂空白质控 内参照 5 6 阴性对照 阳性对照 1 分析中质量控制（三） 产物检测的质量控制 膜条杂交 基因芯片 检验结果的评价与报告 临床咨询 1 2 严格建立报告单签发、审核制度。报告单除了提供检验结果的基本信息外，还应提供本技术的名称及局限性等。 内容主要包括检验项目的选择、临床标本的采集、标本类型的选择及检测结果的解释等。 分析后的质量控制 分析后质量控制 室内质量控制 (internal quality control, IQC) 第七节 在实验室内部工作人员对所有影响质量的每一个环节进行系统控制，以评价本实验室工作的可靠性程度，监测和控制本实验室工作的精密度，提高常规工作中批内、批间检验结果的一致性，以确定检测结果是否可靠、有效，能否发出报告的一项工作。 最佳条件下的变异（optimal conditions variance, OCV) 常规条件下的变异(rountine conditions variance, RCV) 1 2 是指在某一实验室内，在最理想和最恒定的条件下，对同一质控品进行重复测定（至少20次）所得出的最低变异，代表该检测项目在本实验室能达到的精密度的最高水平。。 统计学质量控制—基线测定 室内质量控制 是指在某一实验室内，常规条件下对同一质控品进行重复测定（至少20次）所得出的变异，反映常规条件下该项目检测的精密度水平。 暂定均值和标准差的设定 1 常用均值和标准差的设定 2 1 2 质控品均值和标准差的设定 室内质量控制 Levey-Jennings 质控图方法 室内质量控制 图1 Levey-Jennings 质控图 2 3 4 12s规则 13s规则 22s规则 R4s规则 5 6 41s规则 10X规则 1 Westgard多规则质控方法 图2 Westgard多规则质控逻辑图 室内质量控制 即刻质控方法 室内质量控制 即Grubs异常值取舍图，只要有3次质控检测值就可用此法进行检测。该法适用于没有每天进行检测的项目或试剂盒有效期较短的项目 SI上限=（X最大值-X均值）/SD SI下限=（ X均值-X最小值）/SD 室内质控数据的评价 室内质量控制 2 3 4 检查质控图，确定误差类型 判断误差类型和失控原因的关系 检查多项目检测系统上常见的因素 查找与近期变化有关的因素 5 确认解决问题，做好记录 1 失控原因的分析与处理 阴性质控品失效的原因、处理与预防措施 2 3 4 扩增产物污染 标本交叉污染 基因组DNA或质粒污染 试剂污染 1 2 实验室严格分区，制定SOP并严格执行 使用化学试剂去除污染源 3 对扩增产物进行修饰，如紫外线和UNG方法 1 4 5 6 使用一次性耗材 使用带滤芯的吸头 避免临床“假阳性问题” 室内质量控制 阴性