亚病毒分类的课件.pptxVIP

第六章亚病毒感染因子Subviral agents非细胞生物真病毒：至少有核駿和蛋白质两种组分Euvirus类病毒：只含具有单独侵染性的RNA组分viroid脆病毒：只含蛋白质一种组分prion卫星病毒、卫星RNA:天生缺陷病毒，亚病毒：Subvirussatellite virus包括卫星RNA一、类病毒viroidPotato spindle tuber disease, PSTD? 1922年发现，减产20%-70%?潜伏期长，提纯和电镜观察无病毒粒子?瑞士学者T.O.Dienerl971年发现马铃薯纺锤形块茎 病的病原是一种只有侵染性小分子RNA而无蛋白 质的感染因子，称为类病毒(viroid)——PSTV。类病毒经带毒叶片、种子以及媒介昆虫传播，可引起马铃薯、 西红柿、苹果、柑桔、椰子等多种经济植物严重病害T.O. Diener几项研究试验（1967-1971,用番茄研究）超离心：105 000 Xg仅10%在沉淀中1、有机溶剂处理：（去脂肪）沉降系数不变2、（蛋白变性）侵染活性更高3、酚处理：核酸酶处理： RNase处理，丧失活性4、5.密度梯度离心： PSTV沉降系数7?10S定义? 类病毒是一个裸露的闭 合环状RNA分子，它能感染寄主细胞并在其中 进行 自我复制使寄主产生病症。?类病毒的分子量小，仅为最小RNA 病毒的十分之一，约10万Da类病毒是共价闭合的单链环状RNA分子，大小为246-399个核 昔酸。所有的类病毒RNA没有mRNA活性，不编码任何蛋白马铃暮纺锤形块茎病类病毒Potato spindle tuber viroid (PSTV)提纯后的PST V在电镜下观察（脉展层）:长50nm的棒状dsRNA分子，由2个互补的半体组成，一个含179个核甘酸，另一个两者间有70%的碱基以含180个核昔酸,■氢键方式结合，形成122个碱基对，整个 棒状结构中有27个内环，最大的螺旋含8!大的内环含有12个核吾酸。个碱基对,L=PSTV的结构30 60 90 120 學359 330 360 270 240 210马铃薯纺锤形块茎窄病毒（PSTV）的结构模型T2T1 PRC—J左手末端0右手未端结构区 致病结构区 中央保守区 可变区 结构区类病毒的分类目 前ICTV公布的类病毒冇27种, 个科、7个属：1、马铃薯纺锤形块茎类病毒科5属分为22、鳄梨白斑类病毒科2属类病毒病诊断和鉴定1Kochs postulates］、在病体中找不到纟田胞牙口体纟田胞的致病因 子，可机械摩擦或昆虫媒介传染2、 检颈！J4、分子核酸5S?7S,区别于植物的RNAPAGE 浓度5%、10%、20% （一般病毒2%）3、 接种 电泳带酚抽提液扌妾种敏感寄主4、提纯生产实际诊断的几种方法1、指示植物2、 凝胶电泳（应用广，但手续复杂）3、 M补DNA （精确，适用）分子杂交，有已知类病毒RNA类病毒的提纯破坏寄主DNA（去掉）之清（去掉） 畛相（去掉）上清沉淀（类病毒）类病毒致病性机理? 类病毒RNA分子直接干扰寄主细胞的核酸 代谢? 类病毒也能结合到前mRNA的识别位点上,? 类病毒的+RNA和?RNA还能作为寄主基因组，与依赖于DNA的RNAM合酶II结合，使之指导类病毒的复 制，，坏了 mRNA的合成。类病毒复制? 类病毒的遗传信息不足以编码任何复制酶? 健康植物中含两种类型的RNA合成系统:1、 依赖于DNA的RNA聚合酶I、II和III2、 依赖于RNA的RNA聚合酶? 类病毒RNA在分子内的高度碱基配对和G:C含量，使其非常象DNA分子，寄主的的RNA聚合酶可能以其作模板合成类 病^毒的RNA类病毒复制的滚环理论:类病毒前体+ RNARNA寡聚物,+RNA寡聚物共价闭合 裂解成+RNA单位 ___-环状分子末端修饰长度的线状分子类病毒复制的滚环模式类病毒复制的滚环理论环状类病毒进入宿主细胞后：首先以(+)链类病毒为模板转录生成多个单位长度的(?)链复制中 间体，其(-)链复制中间体有两种可能的命运：?先被切割，再环化：(?)链复制中间体先被切割生成单位长度 的线状(?)链分子，再自我环化，然后以环化㈠链为模板转录 出多个单位长度的(+)链复制中间体，再进一步修饰和连接， 形成具有感染性的单体环化的类病毒分子；?先转录，再被切割修饰：多个单位长度的(?)链复制中冋体直 接转录生成(+)链复制中间体的模板，然后剪接修饰。?鳄梨白斑类病毒ASBVd(+)链和㈠链复制屮间体屮均发现有 锤头样核酶结构，推测可能采取第1种复制途径，而PSTVdIIP可能是利用第2种复制途径。类病毒的起源推测、设想：1、 原始生命形态非生命一类病