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中华绒螯蟹交配系统的形态功能 自然选择和性选择理论一般认为每个物种独特的交配器官造就了物种间的生殖隔离雄蟹交配系统通常由一对阴茎及第一、第二对腹肢组成。阴茎较短，一般是螃蟹生殖系统射精管部分外延而成，而腹肢则特化为生殖肢(Gonopod)，行交配功能雌性生殖道由阴户和阴道组成。阴户一般位于螃蟹第六胸节，某些物种还上附一厚实富含几丁质的盖子(Chitinous opercula)。阴道起源于外胚层，内表面覆有一角质层，每个蜕壳周期均可脱落中华绒螯蟹(1 材料与方法1.1实验材料实验用蟹由江苏大仁水产良种有限公司射阳县金源育苗场提供(体重, 雄性约300 g，雌约200 g)，交配实验及后续工作在盐城师范学院湿地学院江苏省滩涂生物资源与环境保护重点实验室完成。为节约样本成本，本文除用于交配实验的未交配样本(雌雄各5只，于2019年12月5日提供)，后续用于组织结构观察样本(雌雄各10只)，雄性来源于苗场已完成交配任务的去雄蟹(2019年12月23日提供)，而雌蟹则是已出苗后的个体(2020年4月4日提供)。1.2实验方法1.2.1急速冷冻实验 交配实验于直径1.2 m，高0.7 m的5个柱状圆桶内进行，桶底铺有约10 cm厚的细沙，水深0.5 m，水体盐度25，水温15~18 ℃。待实验开始后，每个桶内放入一对雌雄亲本，期间每隔30 min观察一次，一旦发现其抱对交配(图1A)，迅速放入事先装有液氮(-196 ℃)的泡沫盒内。急速冷冻实验操作规程参考Mattei等1.2.2光镜观察 取雌雄螃蟹各3只，解剖后分别取下其完整的交配器官(雄：G1/G2；雌：生殖道，包括纳精囊)，保存于95 %的酒精内固定。24 h后在体视镜(Leica，M205A)下观察交配器官的外部形态，并拍照分析。1.2.3 扫描电镜(Coxem，EM-30AX)观察 为进一步获取交配器官(主要是雄蟹G1/G2)关键部位的组织结构信息，另取雄蟹3只的交配器官进行扫描电镜观察。步骤简述如下：1)G1/G2在剔除多余组织后在95%乙醇溶液中固定48 h；2)将样本置于烘箱42 ℃恒温干燥48 h；3)待组织完全干燥，便用电镜专用导电胶将组织固定于圆形台座上并对样品进行喷金处理；4)在连接电镜的可视屏幕中寻找所需要观察的部位，调节焦距倍率后进行察拍照分析。1.2.4 组织学观察 为进一步了解交配器官内部组织结构及G1/G2的协作情况，取4对雄蟹腹肢和雌蟹生殖道，放入含10%中性甲醛的酸性脱钙液(百奥莱博，KFS015)中固定脱钙，处理时间为48 h。待组织完全脱钙后，分别经系列酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡及组织包埋后，进行常规石蜡切片(厚度7 μm，Leica，RM2235)；随后进行 Mallory PTAH染色(如吉生物科技，SJH0278)并在显微镜(Leica，DM2000)下观察拍照。2 结果与分析2.1 雌雄抱对交配急速冷冻后，瞬间固定了雌雄个体的交配姿态(图1A)：雄性上位，雌性打开腹腔允许雄性介入。雄性交配器官整体隐藏在其腹部下面，腹肢只保留G1/G2，后续4对完全退化；G1/G2作为交接器，组成了雄性交配系统的主要器官(图1B)。雌性生殖道由一对阴门和阴道组成(图3A-C)。观察发现交配时G1并没有直接插入雌蟹的生殖道内，而是与阴门及周边胸板直接契合，通过与G1共同进化出“对接状”的交配系统，以保障精荚精液等雄性产物成功通过阴道输入纳精囊内储存。2.2 雄性交配系统(1) G1和G2外部形态第一腹肢(G1)整体粗壮光滑，由链接腹部的原肢和内肢组成(图1C)。原肢较短，由基节和底节融合而成，作为基座与内肢绞合衔接。内肢长而挺直，成三角柱状，略微向背腹轴线内侧倾斜。三角柱一面近乎与腹腔中线纵截面平行；柱状背面近内侧部分留有内肢两侧边缘高度融合而成的一道缝合沟，纵贯内肢两端；腹面两侧稍有内陷且程度由基部向顶端弱化(图1C, F)。内肢基部背面近内侧开口比较大，可分为内外两部分：外侧部分上覆盖1带羽状刚毛的肉状瓣膜，交配时，雄蟹本身突出在腹甲第8胸节上的膜质阴茎(或通过瓣膜)可以伸入这开口的外侧部分内；内侧部分由G2插入(图1G)。内肢顶端从上往下观整体成半球形，腹面内侧与平行面汇合处形成一个明显的瘤状隆起为制高点(图1D)，端口自此整体略向腹面一侧倾斜降低；中间含一输送精液等雄性产物的通道，向外突出，类似火山口，环壁及内侧布满浓密的刚毛。内肢刚毛主要集中在端部，少许沿缝合沟两侧分布；刚毛修长，顶端尖锐，基部圆柱状切入，呈咖啡色，自隆起处向四周长度逐渐增加(图1D, E)。第二腹肢(G2)细小，长度不及G1的1/5，亦由链接腹部的原肢和内肢组成。内肢整体光滑，呈扁平指状，由