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部分发酵产品生产工艺及培养基配方
我国 1958 年才开始赤霉素的研究、生产和推广应用,并于 1969 年因为党的 “九
大召开及国庆 20 周年,故把赤霉素称之为 九二 O”.2 5n m’发酵罐工业化生
产试验
2.1 试验材料与方法
2.1.1 菌种:G—l14
2.1.2 试验地点:湖南生物制药厂.
2.1.3 培养基
① 种子培养基 (w/w):葡萄糖 1.5,糊精 1.0,花生粉 1.5,MgSO4 ·7HzO
0.1,KH2PO4 0.1,消泡剂 0.2,自来水配制,自然pH 值,6m3 种子罐中投料 3m3 ,
实罐消毒 121℃ ,30 分钟,冷却至 28℃待接种。
② 发酵培养基(w/w):玉米淀粉 7.0,饴糖 2.5;豆饼粉 0.3,花生粉
1.0,MgSO4 ·7H2O 0.07,KH2PO4 0.14;消沫剂 0.05, a 一淀粉酶,50m3 发
酵罐投料 40m3。pH 值自然,实罐消毒 121C,30 分钟,冷却至 28℃后接入种子
培养液.
2,1.4 发酵设备;种子罐 6 m3,二档搅拌. 发酵罐体积 50m3。,三档搅拌. 流
加罐用
另一种子罐代替.
2.1.5 发酵条件
种子罐:培养温度 28℃ 士 I℃ ,通风量 l:I v /v,罐压0.4—0.5 k /cm2.
发酵罐:培养温度 28 士 l℃ ,通风量 l:0.7 v /v,罐压 0.1—0.15 k /
cm2.
赤霉素发酵参考环境:10~60 吨罐,搅拌转速 115 转/分,通风量 1:1/分, 培
养温度大多采用 29℃~32℃ 。培养基的起始pH 值控制在左右,而将发酵过程
的pH 值维持在~之间为宜。种子培养基:葡萄糖,蒸馏水 lOOml。豆饼粉 ,淀
粉,葡萄糖,KH2PO4 ,(NH4)2SO4 0.05 ,MgSO4 ,自来水 lOOml。
发酵培养基:豆饼粉%.淀粉%,葡萄糖%,KH2PO4 %,%,
a-淀粉酶%,pH 5~发酵周期 130 小时
阿维菌素:
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种子培养基 (g/L):淀粉30,豆饼粉20,酵母粉,CoCl2 ·6H20 ,pH 7.0~7.2。
发酵培养基(g/L):淀粉50,玉米粉 l0,酵母粉 l0,豆饼粉 10.CaCO3 ,CoCl2 ·6HaO
0.0005,pH ~ 。
妥布霉素发酵培养基:黄豆饼粉;葡萄糖; 玉米粉; 玉米淀粉; (NH4)2SO4 ;
鱼粉;MgS04 ; 油;ZnSO4 ;CaCO3 ;温度 37℃,发酵时间 112h 左右。发酵菌
种采用黑暗链霉菌。
洛伐他汀培养基:淀粉,黄豆饼粉,葡萄糖,玉米浆,K2HPO4,(NH4)2S04,CaCO3,
发酵菌种采用红曲菌株,。发酵周期 10 天。
甾体激素氢化可的松菌种:蓝色犁头霉 (As365),培养基 (%) 葡萄糖,酵母膏,玉
米浆,硫酸铵;pH 值~;m1),28℃ 培养 24h,投入%的RSA (发酵底物醋酯化
合物:17a 一羟基孕甾一 4 一烯一 3,2O 一二酮一 21 一醋酸酯,RSA),然后转
化 36~42h。
综上所述,在利用整肠生菌(Bacillus Licheniformis)等杆菌发酵生产杆菌肽
中,由于前期微生物生长繁殖迅速,碳源消耗量较大。在发酵中后期的碳源主要
用于杆菌肽次级代谢产物的合成,故碳耗较平稳。所以碳源不宜过多,2%~3%
为宜。同时杆菌肽生产与其它抗菌素生长碳源不同,实验表明,加入3%柠檬酸
作为碳源最佳,以保证菌体迅速生长。如果中后期碳浓度过高,会引起菌体生长
太快,而减少杆菌肽合成。所以,对碳源种类的选择和控制至关重要,在选择适
合种类碳源的条件下,碳源量的控制方法可采用碳比消耗速率、菌体比生长速率
和控制流加碳源速度。同时,由于过量磷酸盐对杆菌肽前体氨基酸形成有抑制作
用,从而干扰杆菌肽的合成。所以,无机磷酸浓度应控制在 0.1~1.0 mmol /
L,以便既能满足菌体生长需要又不影响杆菌肽的合成。此外用整肠生菌发酵生
产杆菌肽,发酵 pH 为 7.5,发酵时间为 40 h 为宜。
杆菌肽是利用整肠生菌发酵 pH 为 7.5,发酵时间为 40 h
杆菌肽发酵参考环境:5~100 吨罐,搅拌转速 100 转/分,通风量 1:1/分,罐
压公斤, pH 左右,培养基主要成分为液化淀粉,豆粕,柠檬酸,各种无机盐适
量,发酵菌种采用整肠生菌,发酵周期 40
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