一种真核细胞核酸提取方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 106350512 A (43)申请公布日 2017.01.25 (21)申请号 201611050681.8 (22)申请日 2016.11.24 (71)申请人 深圳华大基因股份有限公司 地址 518083 广东省深圳市盐田区洪安三 街21号华大综合园7栋7层-14层 (72)发明人 郑建超　李圳洽　袁景风　于静　 张燕　王夏曼　张红云　 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅　白艳 (51)Int.Cl. C12N 15/10(2006.01) 权利要求书1页 说明书8页 序列表1页 附图1页 (54)发明名称 一种真核细胞核酸提取方法 (57)摘要 本发明公开了一种真核细胞核酸提取方法。 本发明提供了一种核酸提取方法，包括如下步 骤：将待测样本和碱性液体混匀后在高温条件下 反应，得到核酸。本发明的实验证明了本发明的 方法，与现有的DNA提取方法相比，省去了多次清 洗、温浴和离心等操作步骤，通过在样本周围创 造一种碱性高温的液体环境，加速真核细胞膜破 裂和蛋白质变性，能够使真核基因组DNA的提取 效率大大提升，实现了快速的DNA提取；在样本类 型及实验室条件方面无特殊要求，是一种适用面 广，适合普遍推广应用的核酸提取方法。 A 2 1 5 0 5 3 6 0 1 N C CN 106350512 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种真核细胞核酸提取方法，包括如下步骤： 1)将待测样本和碱性液体混合，得到混合后的溶液； 2)将所述混合后的溶液在高温条件下反应，得到核酸。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述碱性液体为DEB溶液，所述DEB溶液为 pH值为8-13的氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述DEB溶液的浓度为1μmol/L-0.1mol/L。 4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述高温为80-100℃。 5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述反应的时间为1min-50min； 或所述反应的时间为10min。 6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述核酸为DNA和/或RNA。 7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述待测样本为全血、干血片、唾 液、口腔拭子、细胞保存液、发根、血斑或精斑。 8.一种真核细胞核酸提取试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的试剂为权利要求1-7任一 所述方法中的所述碱性液体。 9.根据权利要求8中所述的试剂盒，其特征在于：所述碱性液体为pH值为8-13的氢氧化 钠水溶液或氢氧化钾水溶液；或者所述碱性液体为1μmol/L-0.1mol/L的氢氧化钠水溶液或 氢氧化钾水溶液。 10.权利要求1-7任一权利要求所述的核酸提取方法所得核酸在PCR扩增中的应用。 2 2 CN 106350512 A 说　明　书 1/8页