紫外可见吸收光谱法 PPT.pptxVIP

紫外可见吸收光谱法紫外--可见吸收光谱法(UV-VIS) :也称紫外--可见分光光度法 是依照物质分子对波长为200-800nm这一范围的电磁波(紫 外200-400nm与可见光谱区400-800nm)的吸收特性建立起来的一种定性、定量与结构分析方法。分子吸收光谱主要产生于分子的外层价电子在电子能级之间的跃迁 紫外区可分为远紫外区(10~200nm)与近紫外区(200~400nm)。因空气中的氧、二氧化碳与水汽等都吸收远紫外光,因此,要研究分子对远紫外光的吸收需要在真空条件进行,故使其应用受到限制。通常说的紫外－可见吸收光谱是指近紫外－可见吸收光谱,即物质分子吸收200～800nm波长范围内的光辐射所产生的吸收光谱。 原子吸收光谱法与紫外－可见分光光度法的比较相同点: 均属于吸收光谱; 其波长范围均在近紫外到近红外光区( 200～800nm)。原子吸收光谱法与紫外－可见分光光度法的比较不同点: 吸收机制不同: 原子吸收光谱属于原子光谱,是由基态原子所产生的吸收,是线状光谱,谱线宽度特别窄,其半宽约为10－3 nm;而紫外－可见光谱是属于分子光谱,为带状光谱,谱带特别宽,其半宽约为10 nm。 光源不同:前者为锐线光源,如空心阴极灯; 后者为连续光源,如钨灯、氘灯。 仪器排布不同: 前者:锐线光源－原子化器－单色器－检测器 后者:光源－单色器－吸收池－检测器紫外-可见分光光度法的特点:1 与其它光谱分析方法相比,其仪器设备与操作都比较简单,费用少,分析速度快。2灵敏度高。如在紫外区直截了当检测抗坏血酸时,其最低检出浓度可达到10-6g/mL。3选择性好。通过适当的选择测量条件,一般可在多种组分共存的体系中,对某一物质进行测定。4周密度与准确度较高。在仪器设备与其他测量条件较好的情况下,其相对误差可减小到1%~2%。5用途广泛。在生物、医药、化工、地质等诸多领域,不但能够进行定量分析,还能够对被测物质进行定性分析与结构分析,进行官能团鉴定、相对分子质量测定、配合物的组分及稳定常数的测定等。 第一节 分子吸收光谱的产生一、物质对光的选择性吸收光在与物质作用时,物质可对光产生不同程度的吸收。物质的结构决定了物质在吸收光时只能吸收某些特定波长的光,也就是说,物质对光的吸收有选择性。当一束白光(复合光)通过硫酸铜溶液时,水合铜离子选择性的吸收复合光中的黄光,故溶液呈现出黄色的互补色——蓝色。我们通常见到的有色物质,都是由于他们吸收了可见光的部分光,呈现出吸收光颜色的互补色。 二、分子吸收光谱的产生分子吸收光谱的形成是由于电子在能级之间的跃迁所引起的。分子内部具有电子能级、振动能级与转动能级。因此分子的能量E分子＝E电＋E振＋E转 。 这些能量是量子化的,只有光辐射的能量恰好等于两能级之间的能量差时,才能被吸收。分子内部三种能级跃迁所需 能量大小的顺序为: ΔE电 ΔE振 ΔE转 分子的电子跃迁所吸收的能量比后二者大的多 1、 ΔE电 约为1～20eV,所吸收的电磁辐射波长约为1240～62nm,主要在紫外与可见光区。2、 ΔE振约为0、05～1eV,相应的分子吸收光谱为红外光谱。3、 ΔE转 约为0、005～0、05eV,与之对应的分子吸收光谱为远红外光谱。为什么分子的紫外、可见光谱不是线状光谱,而是带状光谱？谱带为什么变宽？ 通常,分子是处在基态振动能级上。当用紫外、可见光照射分子时,电子能够从基态激发到激发态的任一振动(或不同的转动)能级上。因此,电子能级跃迁产生的吸收光谱,包括了大量谱线,并由于这些谱线的重叠而成为连续的吸收带。 绝大多数的分子光谱分析,都是用液体样品,溶液中相邻分子间的碰撞能导致分子各种能级的细微变化,引起吸收带的进一步加宽与汇合。仪器的分辨率有限,因而使记录所得电子光谱的谱带变宽。紫外-可见吸收光谱(吸收曲线): 描述物质分子对辐射吸收的程度(吸光度)随波长而变的函数关系/view/400.htm曲线。波长为横坐标,吸光度或透光率为纵坐标紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。 1、定义:以吸光度A为纵坐标, 波长λ为横坐标,绘制的A~λ曲线。2、吸收光谱术语: ①吸收峰→λmax ,②吸收谷→λmin ③肩峰→λsh , ④末端吸收525nm特征值紫外-可见吸收光谱最大吸收波长(λmax)是分子的特征常数,与化合物的电子结构有关,可用于推测化合物的结构信息;整个吸收光谱的形状取决于物质性质,反映分子内部能级分布状况,是物质定性的依据。吸收曲线的纵坐标则用光强表示,强度参数可用透光率、吸光度与吸光系数表征。 叶酸 透光率T:为透射光的强度I与入射光的强度I0之比。 T＝I/ I0吸光度A:表示单色光通过溶液时被吸收的程度,定义为入射 光的强度I0与透射光的强度I之比的对数值。 A