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药用植物组织培养资料 药用植物组织培养 [.药用植物组织培养的定义及组培中所涉及的主要概念。 定义：是指在无菌条件下，将离体的药用植物器官、组织、细胞及原 生质体，培养在人工培养上和人工控制的环境中，使其生长、分化、形成 新的植株的过程和技术。（乂称植物离体培养、植物克隆） 组培中所涉及的主要概念： 培养基：指根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配制 的营养基质。初代培养：也叫第一代培养，指将从植物体上分离下来的 材料进行的一次培养。继代培养：将初代培养的培养物转移到新的培养 基上继续培养。 固体培养基：指把加入琼脂或结冷胶使培养基呈固体状态的培养。 外植体：由植物体上切取下來用于组织培养的离体材料。（泛指第一 次接种所用的植物组织、器官等一切离体材料。） 愈伤组织：指外植体因受伤或离体培养吋，其未分化的细胞和已分化 的细胞进行活跃的分裂，形成的一种无特定结构和功能的薄壁细胞。 植物组织培养的理论基础是什么？ 理论基础：细胞具有全能型。 我国药用植物的组织培养起源于20世纪60年代，哪位学者首先进 行了何种药用植物的研究？ 罗士伟教授人参的组织培养 什么吋间进行了植物体内冇效成分生产的组培研究？ 1969年，kaul发现三角叶薯菽悬浮培养物可以生产薯菽皂昔配基，从 而 植物组织培养的特点？ 特点：（1）＞培养条件可以人为控制； （2） 、生长周期短，繁殖率高； （3） 、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。 一般药用植物组织培养实验室由那些分室所组成?各分室的作用及 所需仪器设备等。一般药用植物组织培养实验室由准备室（条件许可的 情况下，可细分为储存室、洗涤室、配制室）、无菌操作室、培养室和温 室。 （1） 准备室： 作用:主要进行一些常规的试验操作，如所需器皿的洗涤、干燥和保 存，培养基的配制和灭菌，蒸憾水的生产，常规的生理生化分析，以及组 织培养屮常用的化学试剂、玻璃器皿的存放。 所需仪器设备：普通天平（1/10）。分析天平（1/10000）、冰箱、高 压蒸汽灭菌锅、蒸憾水制造装置、干燥箱或烘箱、酸度计（或PH试纸5.0-7.0）、 微波炉或电炉、药品柜及培养容器、分注器等。 （2） 无菌操作室 作用:主耍进行植物材料的表面灭菌、接种及培养物的继代转接等。 所需仪器设备：超净工作台、周转小推车、紫外灯、（显微镜、显 微摄影装置）、酒精灯、 辍子剪刀类、细菌过滤器。 （3） 培养室 作用:对接种后的材料进行培养，使其生长、分化的场所。 所需仪器设备：为了满足培养材料生长、繁殖所需的温度、光照、 湿度和通风条件，培养室必须有培养架日光灯、电炉或空调、自动定时器 以及增湿机或去湿机、震荡培养机等。 （4） 温室 作用:栽培提供组培取材用的材料，或作为试管苗炼苗、移栽管理的 场所。 所需仪器设备：喷雾、灌溉装置（灌输、增加空气湿度等），遮阴 网（进行遮光处理），移植床等设施。 若对某种药用植物进行组培时选材需考虑那些因素？ 外植体的选择 （1） 取材部位 部位不同，培养的难易程度不同，冇的部位來源困难, 有的部位容易变异，因此，选材时既耍考虑培养成苗的难易程度，又耍考 虑材料來源是否冇保障，同时兼顾遗传稳定性。一般幼嫩的茎、叶为最理 想的。 （2） 取材季节 在取材季节上，应尽量选择旺盛生长的季节取材，因旺 盛生长时期的材料内源激素含量较高，再分化比较容易。 （3） 材料的老嫩在外植体的选择上应尽量选择未分化或分化程度较 轻的组织作为外植体。年幼的组织比年老的组织好培养，因而茎尖和嫩梢 是很好的外植体材料0 材料的大小材料越少，带毒越少，但不易成活。 污染是组培中经常发生的，而引起污染的污染源主耍有哪些？其表 现特征为？预防措施为？ 污染源主要有：细菌和真菌 细菌性污染： 主要表现：在培养基某一位置或培养材料周围出现黏液状物或浑浊的 水迹状痕迹，有时呈现发酵状泡沫。一般在接种「北后即可发现。 真菌性污染： 主要表现：培养基污染部位发霉，出现黑、白、黄等不同颜色的霉菌， 一般在接种后3~5d或更长时间后才会出现。 预防措施： 1?选择植物材料 取材时选择带菌少的时期、部位等进行培养。 严格消毒灭菌 ⑴培养基：灭菌时耍检查高压蒸汽灭菌的温度、压力、时间和正确使 用情况；⑵接种环境：是否对接种室定期用甲醛和高猛酸钾混合液熏蒸， 接种前用紫外灯消毒、保持室内清洁、干燥和密闭等； ⑶接种用具：接种用具是否进行灭菌处理等； 3 ?规范操作 整个接种操作过程是否规范、熟练等。 对接种室进行灭菌的方法主要冇哪两种？ 定期用甲酸及高猛酸钾熏蒸 （2）工作前还应用紫外灯照射20分钟及用70%酒精喷雾降尘。 组织培养屮，一般培养温度设定为？ 25 士 2oC 6?接种的定义为？ 接种：把处理好的外植体经无菌操作程序转移到培养基上的过程 对