医学检验教材课件第六节 免疫溶血性贫血检验.pptVIP

第六节 免疫溶血性贫血检验 第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 上海交通大学医学院 王也飞 第四章 红细胞检验技术 第六节 免疫溶血性贫血检验 抗球蛋白试验 冷凝集素试验 冷热溶血试验 目录 重点提示 免疫性溶血性贫血的检验项目； 抗球蛋白试验的临床意义。 第六节 免疫溶血性贫血检验 一、抗球蛋白试验 【实验原理】抗球蛋白试验(coombs test) 分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗球蛋白试验（IAGT）。直接试验应用抗球蛋白试剂与红细胞表面的IgG分子结合，出现凝集反应，即为直接抗球蛋白试验阳性。间接试验应用Rh（D）阳性O型红细胞与受检血清混合孵育，若血清中存在不完全抗体，可使红细胞致敏，再加入抗球蛋白血清，可出现凝集反应，即为间接抗球蛋白试验阳性。 【参考区间】正常人直接和间接抗球蛋白试验均为阴性。 阴性 阳性 DAGT 原理图 一、抗球蛋白试验 间接抗球蛋白试验(indirect antiglobulin test，IAGT) IAGT 原理图 一、抗球蛋白试验 【临床意义】 抗球蛋白试验是诊断自身免疫性溶血性贫血（AIHA）的重要指标。 AIHA直接抗球蛋白试验阳性，当抗体与红细胞结合后，有过剩抗体时直接和间接试验均为阳性。 2. 冷凝集素综合征、阵发性冷性血红蛋白尿症、药物性免疫性溶血、新生儿同种免疫性溶血、溶血性输血反应、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、淋巴细胞增殖性疾病、恶性肿瘤及某些慢性肝、肾疾病等直接抗球蛋白试验可呈阳性。 3. 新生儿同种免疫溶血病直接和间接试验均呈强阳性，可持续数周，输血或换血数天后可变成阴性。由ABO血型不合引起的溶血，常为阴性或弱阳性。 一、抗球蛋白试验 【应用评价】 本试验主要用于AIHA的诊断和分型诊断，直接试验最为常用，也更有诊断价值，它能敏感地测定吸附在红细胞膜上的不完全抗体和补体。 间接试验主要用于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血病母体血清中不完全抗体的检测。脐血的直接试验阳性有助于新生儿溶血病的诊断。温抗体（IgG）型AIHA直接试验呈强阳性反应，间接试验多为阴性。 一、抗球蛋白试验 【实验原理】冷凝集素综合征（cold agglutinin syndrome，CAS）患者的血清中存在冷凝集素，为IgM型完全抗体，其在低温时可使自身红细胞、O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。凝集反应的高峰在0℃～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。 【参考区间】健康人血清中抗红细胞抗原的IgM冷集素效价＜1∶16 （4℃）。 二、冷凝集素试验 红细胞凝集 二、冷凝集素试验 二、冷凝集素试验 【临床意义】阳性主要见于冷凝集素综合征患者。流行性感冒、支原体肺炎、传染性“单个核细胞”增多症、淋巴瘤、疟疾等可引起冷凝集素效价继发性增高。 【应用评价】本试验方法简便、易于开展，是诊断冷凝集素综合征的主要依据。冷凝集素综合征患者本试验阳性，效价可达1∶1 000以上，病理性冷凝集素存在时一般于4℃滴度≥1∶256。若反应温度在30℃时效价仍高，甚至高于4℃滴度，更有病理意义。 三、冷热溶血试验 【实验原理】阵发性冷性血红蛋白尿症（PCH）患者血清中存在一种特殊的冷反应抗体即Donath-Landsteiner抗体（D-L抗体）。此抗体在20℃以下（常为0℃～4℃）时与红细胞结合，同时吸附补体，但不发生溶血。当温度升至37℃时，补体被激活，红细胞膜破坏而发生急性血管内溶血，故本试验又称为冷热溶血试验（Donath-Landsteiner test）。 【参考区间】健康人为阴性。（免疫法） 0℃静置30min，37 ℃静置60min，1000g离心5min。 A1-A2：D-L抗体（+） A3： D-L抗体（-） 三、冷热溶血试验 【临床意义】阳性主要见于阵发性冷性血红蛋白尿症患者。某些病毒感染如麻疹、流行性腮腺炎、水痘、传染性“单个核细胞”增多症等也可出现阳性反应。 【应用评价】本试验是检测冷溶血抗体简易的过筛试验，对阵发性冷性血红蛋白尿症诊断有一定价值，患者D-L抗体效价可高于1∶40。但若患者近期正处于溶血发作，由于补体已被消耗，可出现假阴性结果。 三、冷热溶血试验 第六节 免疫溶血性贫血检验