药物的体外抗菌试验.pptVIP

药物的体外抗菌试验 第一页，共22页。 药物的体外抗菌试验 用途： 抗菌药物的筛选、药物的抗菌谱测定及临床药物敏感性试验等方面。 第二页，共22页。 抑菌：即抑制微生物的生长繁殖，但不能杀死微生物，在药物除去后微生物又能生长； 杀菌：即能杀死微生物，当药物除去后，微生物也不能再生长繁殖。 两者并非绝对，只是在一定条件下相对而言。 第三页，共22页。 常用的体外抑菌试验 琼脂扩散法 滤纸片法 挖沟法 连续稀释法 第四页，共22页。 琼 脂 扩 散 法 原理： 药物可以在琼脂培养基中自由扩散，形成一定浓度的含药区域。 由于各种微生物对不同药物或同一药物不同浓度的敏感性不同，因而形成一定大小的抑菌圈或抑菌距离，根据其大小，可以了解药物的抗菌作用大小或是微生物对试验药物的敏感性。 第五页，共22页。 滤纸片法： 制成含菌平板后，将滤纸片蘸取药液置于平板上，培养后观察结果，量取抑菌圈直径以此判断试验药物抑菌作用的强弱。 用于新药的初筛及临床的药敏试验。 第六页，共22页。 第七页，共22页。 挖沟法： 1、在琼脂平板上挖沟，沟两边垂直划线接种各种试验菌，沟内加入药液。 2、培养后，根据沟两边所生长的试验菌离沟的距离来判断药物对试验菌的抗菌作用强弱。 适用于在一个平板上试验一种药物对几种不同试验菌的抗菌作用。 第八页，共22页。 第九页，共22页。 琼脂扩散法具有方法简便，技术要求不高，易掌握操作的特点。但精确度不高，一般能用于定性或初步判断其作用的强弱。 液体稀释法是一种测定药物的抗菌作用定量方法，较琼脂扩散法精确，因而运用较普遍 。 第十页，共22页。 连续稀释法 可用于测定药物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。可以用液体培养基，也可用固体培养基。 凡能抑制试验菌生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度 （Minimal inhibitory concentration，MIC）。 以培养后无细菌生长的最高药物稀释度为最小杀菌浓度（Minimal bactericidal concentration，MBC）。 第十一页，共22页。 液体连续稀释法 1、在一系列的试管中用液体培养基将试验药物作连续对倍稀释，使药物的浓度沿试管顺序成倍递减。 2、再于各管中加入等量的实验菌，经 16～24 h培养后，与阴性及阳性对照管进行对照观察。 3、将未长细菌的培养液取出，分别转种琼脂平皿。如培养后重新长出试验菌，说明该药仅有抑菌作用。如无菌生长则可以认为该药物有杀菌作用。 第十二页，共22页。 第十三页，共22页。 联合抗菌试验 在药学中，常需要检查两种抗菌药物在联合应用时的相互作用以及抗菌药物与不同PH值或不同离子溶液的相互影响。 加强药物抗菌作用的为协同（synergism）； 减弱药物作用的为拮抗（antagonism）； 互相无影响的为无关（indifference）； 作用二者之和为累加（addition）。 第十四页，共22页。 联合抗菌试验的常用方法 一、纸条试验（paper strip test） 即在已接种实验菌的平板表面垂直放置两条浸有一种药液的滤纸条，培养后根据抑菌区的加强、减弱或无影响来判断它们在联合应用时的效应。 图20-2是纸条实验的示意图。 第十五页，共22页。 图20-2是纸条实验的示意图。图中A列的两纸条中只有一条含有抗菌药物，另一条不含抗菌药物；B列的两纸条均含有抗菌药物。 第十六页，共22页。