医学微生物实验.pptVIP

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  • 2021-10-12 发布于江苏
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医学微生物实验;原理: ;细菌菌落色素观察;细菌菌落溶血现象观察;一、糖发酵试验 原理: 不一样细菌分解糖类能力和分解代谢产物不一样 应用: 常见于肠道细菌判定; 结果判定 培养基变红色 阳性, 记为 + 培养基变红色, 试管内有气泡 阳性, 记为 + 指示剂不变色 阴性, 记为 - ;IMViC是吲哚(indole)、甲基红 (methyl red test)、V-P(Voges-Prokauer test)和枸橼酸盐利用(citrate test)四个试验缩写, 用于快速判别大肠杆菌和产气杆菌(卫生细菌学检验);二、靛基质(吲哚)产生试验(I) 原理: 分解蛋白胨内色氨酸形成靛基质(无色) 靛基质与靛基质试剂中对二甲基氨基苯甲 醛结合而显红色(玫瑰吲哚) 材料: 蛋白胨水培养基(氯化钠、蛋白胨、 蒸馏水);方法: 约0.3ml靛基质试剂渐渐加入细菌蛋白胨水培养物 注: 加入吲哚试剂后切勿摇摆 结果: 大肠埃希菌(﹢)红色 产气杆菌 (﹣)黄色;葡萄糖;材料: 葡萄糖蛋白胨水(葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、蒸馏水) 方法: 结果: 大肠埃希菌, 红色—— + 产气杆菌, 黄色—— -;葡萄糖; 材料: 葡萄糖蛋白胨水 李氏试剂(硫酸铜、 浓氨水、NaOH、蒸馏水) 方法: 暴露于空气中 结果: 大肠埃希菌, 不出现红色(﹣) 产气杆菌, 红色 (﹢);五、枸橼酸盐利用试验(C); 材料: 枸橼酸盐培养基(枸橼酸钠、NH4H2PO4、MgSO4、K2HPO4、NaCl、琼脂、蒸馏水、0.5%溴麝香草酚兰酒精溶液) 方法: 结果: 大肠埃希菌, 绿色(﹣) 产气杆菌, 深蓝色(﹢);用于肠杆菌科属间判别; 分 解;方法: 结果: 变形杆菌, 黑褐色—— + 大肠埃希菌, 不变色—— - ;对蛋白质的发酵; ;判读结果: 每三项为一组, 每组分值为1 2 4 分)将阳性反应分值相加, 得出数据编码, 从API20E编码手册中查细菌名称。 ;(21)半固体培养基(动力试验);材料: 1、 EMB培养基、SS琼脂平板、双糖铁培养基 2、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、志贺菌; 伊红美蓝培养基(EMB);原理: (EMB平板) 非致病菌: ;SS培养基 (Salmonella Shigella Agar Medium);原理: ( SS平板) 非致病菌: ;大肠埃希菌;双糖铁培养基 (Double sugar Iron Medium) 成份 含酚红指示剂pH7.6蛋白胨水 500mL 琼脂(1.3%) 6.5g 乳糖(1%) 5g 葡萄糖(0.1%) 0.5g 硫酸亚铁铵(0.02%) 0.1g 硫代硫酸钠(0.02%) 0.1g 用途 初步判别肠道杆菌;原理: 只分解葡萄糖 : 产少许酸 上层培养基酸+O2→CO2 +H2O 蛋白胨代谢产物 下层培养基不接触空气→培养基呈酸性→显黄色 葡萄糖、乳糖都分解 硫酸亚铁铵: 用以检验细菌分解蛋白质后是否产生硫化氢。; 肠道杆菌生长结果;;方法: 1、每孔加0.5ml N.S 2、倍比稀释病人血清, 第7孔不加做对照 3、每孔加0.5ml抗原 4、轻轻振荡混匀后, 37℃孵育过夜;结果观察;结果分析(1);O抗原 沙门菌属间有交叉反应 IgM H抗原 种特异性 -- 伤寒沙门菌 IgG 甲型副伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌;肉汤增菌结果血平板接种;病例二 患者: 男性, 19岁。恶心、腹痛4h, 伴水样腹泻3次入院就诊。无呕吐、寒颤。腹痛呈阵发性。既往体检无过敏史。 体检: T38.5℃, BP134/75 mmHg, P100次/分, R16次/分。心肺正常。上腹压痛, 而无反跳痛。肝脾未触及。 试验室检验: 粪便镜检可见中性粒细胞, 偶见红细胞。血象正常。尿正常。 问题: 1.该患者可能患了什么疾病?需与哪些疾病作判别诊疗? 2.怎样进行微生物学检验? ;1、病例分析: ;主诉: 阵发性腹痛、腹泻;初诊: 细菌感染引发急性胃

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