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- 约 45页
- 2021-10-12 发布于江苏
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医学微生物实验;原理: ;细菌菌落色素观察;细菌菌落溶血现象观察;一、糖发酵试验
原理:
不一样细菌分解糖类能力和分解代谢产物不一样
应用:
常见于肠道细菌判定;
结果判定
培养基变红色 阳性, 记为 +
培养基变红色, 试管内有气泡 阳性, 记为 +
指示剂不变色 阴性, 记为 - ;IMViC是吲哚(indole)、甲基红
(methyl red test)、V-P(Voges-Prokauer test)和枸橼酸盐利用(citrate test)四个试验缩写, 用于快速判别大肠杆菌和产气杆菌(卫生细菌学检验);二、靛基质(吲哚)产生试验(I)
原理:
分解蛋白胨内色氨酸形成靛基质(无色)
靛基质与靛基质试剂中对二甲基氨基苯甲 醛结合而显红色(玫瑰吲哚)
材料: 蛋白胨水培养基(氯化钠、蛋白胨、
蒸馏水);方法:
约0.3ml靛基质试剂渐渐加入细菌蛋白胨水培养物
注: 加入吲哚试剂后切勿摇摆
结果: 大肠埃希菌(﹢)红色
产气杆菌 (﹣)黄色;葡萄糖;材料: 葡萄糖蛋白胨水(葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、蒸馏水)
方法:
结果:
大肠埃希菌, 红色—— +
产气杆菌, 黄色—— -;葡萄糖;
材料: 葡萄糖蛋白胨水
李氏试剂(硫酸铜、
浓氨水、NaOH、蒸馏水)
方法: 暴露于空气中
结果:
大肠埃希菌, 不出现红色(﹣)
产气杆菌, 红色 (﹢);五、枸橼酸盐利用试验(C); 材料:
枸橼酸盐培养基(枸橼酸钠、NH4H2PO4、MgSO4、K2HPO4、NaCl、琼脂、蒸馏水、0.5%溴麝香草酚兰酒精溶液)
方法:
结果:
大肠埃希菌, 绿色(﹣)
产气杆菌, 深蓝色(﹢);用于肠杆菌科属间判别; 分 解;方法:
结果:
变形杆菌, 黑褐色—— +
大肠埃希菌, 不变色—— -
;对蛋白质的发酵;;判读结果: 每三项为一组, 每组分值为1 2 4 分)将阳性反应分值相加, 得出数据编码, 从API20E编码手册中查细菌名称。;(21)半固体培养基(动力试验);材料:
1、 EMB培养基、SS琼脂平板、双糖铁培养基
2、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、志贺菌; 伊红美蓝培养基(EMB);原理: (EMB平板)
非致病菌: ;SS培养基
(Salmonella Shigella Agar Medium);原理: ( SS平板)
非致病菌: ;大肠埃希菌;双糖铁培养基
(Double sugar Iron Medium)
成份
含酚红指示剂pH7.6蛋白胨水 500mL
琼脂(1.3%) 6.5g
乳糖(1%) 5g
葡萄糖(0.1%) 0.5g
硫酸亚铁铵(0.02%) 0.1g
硫代硫酸钠(0.02%) 0.1g
用途
初步判别肠道杆菌;原理:
只分解葡萄糖 : 产少许酸
上层培养基酸+O2→CO2 +H2O
蛋白胨代谢产物
下层培养基不接触空气→培养基呈酸性→显黄色
葡萄糖、乳糖都分解
硫酸亚铁铵:
用以检验细菌分解蛋白质后是否产生硫化氢。; 肠道杆菌生长结果;;方法:
1、每孔加0.5ml N.S
2、倍比稀释病人血清, 第7孔不加做对照
3、每孔加0.5ml抗原
4、轻轻振荡混匀后, 37℃孵育过夜;结果观察;结果分析(1);O抗原 沙门菌属间有交叉反应 IgM
H抗原 种特异性 -- 伤寒沙门菌 IgG
甲型副伤寒沙门菌
肖氏沙门菌
希氏沙门菌;肉汤增菌结果血平板接种;病例二
患者: 男性, 19岁。恶心、腹痛4h, 伴水样腹泻3次入院就诊。无呕吐、寒颤。腹痛呈阵发性。既往体检无过敏史。
体检: T38.5℃, BP134/75 mmHg, P100次/分, R16次/分。心肺正常。上腹压痛, 而无反跳痛。肝脾未触及。
试验室检验: 粪便镜检可见中性粒细胞, 偶见红细胞。血象正常。尿正常。
问题:
1.该患者可能患了什么疾病?需与哪些疾病作判别诊疗?
2.怎样进行微生物学检验? ;1、病例分析: ;主诉: 阵发性腹痛、腹泻;初诊: 细菌感染引发急性胃
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