大豆异黄酮的提取及电化学行为研究.docVIP

PAGE PAGE 13 大豆异黄酮的提取及电化学行为研究 1 前言 1.1 研究基础 1.1.1大豆异黄酮的作用和研究的重要意义 大豆异黄酮（Soybean isoflavone）是一种黄酮类的化合物，是大豆在它的生长过程中出现形成的一类次级的代谢产物，是一种生物活性物质。因为是从植物中提取的，它有着与雌激素类似的结构，所以大豆异黄酮又被称做是植物雌激素。主要成分为大豆甙，大豆甙元，其分子式为C15H10O2 ，分子式量为222.2387。大豆异黄酮的雌激素作用不仅会影响到生长因子的活性、激素的分泌、蛋白质的合成而且还会影响代谢生物学的活性，可以称为天然预防癌症的化学剂。此外，大豆异黄酮还可以预防由于妇女体内雌激素水平下降，而引起的更年期综合征、并可以预防以及改善由于激素水平的变化或钙和维生素D的不足而引起的骨质疏松、还可以预防乳腺癌、心血管疾病以及早老年痴呆，降低胆固醇等。 近年来，在美国、日本、德国、英国等发达国家及地区出现了大豆异黄酮热的现象，其中美国和日本对大豆异黄酮的研究更是投入了很大精力。1995 年11 月，在芬兰出现了世界上第一个主要原料是大豆异黄酮的功能性食品。目前，主要成分是大豆异黄酮的保健食品已经成为一种新型流行畅销食品。在我国，对大豆异黄酮的研究也已成为了热点。国内大豆异黄酮以食品、保健品、特别是医药中间体的形式出现在公众的视野中，同时也可被用作食品添加剂、药物组分以及保健食品等。 现如今，国内食品科研部门已经加大力度研究开发大豆异黄酮产品，这不仅能提高大豆产品的附加值，还能填补国内市场的空白。然而，自然界中的异黄酮资源却极为有限，即使在含量很高的大豆中，异黄酮也仅占0.1%～0.5%，由此见得，大豆异黄酮具有十分极其重要的研究意义[1]。 1.1.2大豆异黄酮的常用提取方法 目前，最常用的大豆异黄酮的提取方法有：有机溶剂萃取法、超声波辅助法、酶解法、酸解法、高速离心法、超临界萃取法等。由于设备及实验条件控制、可行性比较，本次试验采取的是超声波辅助法。 超声波提取法的原理是它的空化作用对植物的细胞膜的破坏作用可以使植物体内异黄酮类化合物释放出来。此外，超声波使提取液的不断震荡，有助于溶质的不断扩散。而且超声波的热效应可以使水温维持在某一个定值，与水浴作用相类似。由此超声波不仅可以大大缩短提取所用的时间，并且可以提高提取效率[2]。提取大豆中异黄酮的溶剂可以使用乙醇、甲醇等有机溶剂，但综合性价比、毒性、提取效率等各方面因素，乙醇为最佳选择。 1.1.3目前大豆异黄酮的研究方法 目前，大豆异黄酮的分析方法主要有紫外光谱法、红外光谱检测法、三波长法、高效液相色谱法、气相色谱法、高效液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法、毛细管电泳法[3]、单扫描极谱法[4]。 而电化学方法相对于来说，操作简单，灵敏度高，分析前处理简便，容易达到分析的要求，是依据溶液的电化学性质和它的变化规律的一种分析方法，将被测定物质的浓度转化为某种电化学参量或者电化学信号加以输出测量。 其中循环伏安法 (Cyclic Voltammetry)是利用电流、电位进行电化学测量、研究的方法。在进行循环伏安实验时，工作电极的电位随时间变化呈线性斜坡。不同于线性扫描伏安法，在CV实验达到设定电位之后，工作电极的电势被在相反的方向升高到返回到初始电位。根据需要在潜在坡道这些循环可以重复多次。在工作电极上的电流被作图所施加的电压（即，工作电极的电势），得到的循环伏安图跟踪。循环伏安法一般是用来研究在溶液中分析物的电化学性能。 1.2 简介紫外-可见吸收光谱法 紫外-可见吸收光谱法[5]（Ultraviolet-Visible Absorption Spectrometry, UV-Vis）是指吸收光谱或反射光谱中的紫外可见光谱区。这意味着它在可见光和相邻的利用光（近紫外和近红外[NIR]）的范围内。在可见光范围内的吸收或反射，直接影响所涉及的化学品的感知颜色。在电磁频谱的这个区域，分子经历电子跃迁。这种技术是互补的荧光光谱，在该荧光涉及从激发态到基态跃迁，而吸收测量从基态跃迁至激发态。 1.3 简介红外吸收光谱法 红外吸收光谱法[6]（Infrared Absorption Spectrometry ,IR）是用电磁波谱的红外区域涉及的光谱，即光具有较长波长和低频率比可见光。它涵盖了一系列的技术，主要是基于吸收光谱。如同所有的光谱技术，它可用于确定和研究化学品。对于给定的样品，该样品可以是固体，液体或气体，该方法或红外光谱的技术使用被称为红外光谱仪（或分光光度计）的仪器以产生的红外光谱。一个基本的红外光谱实质上是红外光吸收（或透射率）在垂直轴上与横轴上的频率或波长的曲线图。 1.4 简介循环伏安法 循环伏安法(Cyclic Voltammetry