南京大学生化实验1-总糖和还原糖的测定.docVIP

南京大学生化实验1-总糖和还原糖的测定.doc

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南京大学生化实验1:总糖和还原糖的测定   植物总糖和还原糖测定试验报告目标:还原糖,主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物中的分布不仅反映了碳水化合物在植物中的运转,而且是呼吸的基质。还原糖也可以形成其他物质,如有机酸。此外,水果和蔬菜中的糖含量也是增强其品质的一个重要指标。还原糖在生物体的新陈代谢中起着重要的作用。其他碳水化合物,如淀粉和蔗糖,水解后也会产生还原糖。通过本实验,我们掌握了还原糖定量测定的基本原理,实践了比色测糖法的基本操作,并使用了测温仪分光光度计。实验原理:   1.还原糖还原糖是还原糖的总称。含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖具有还原性。如葡甘露聚糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等。   2.美拉德反应美拉德反应广泛分布于食品工业中的非酶褐变反应:   当加热时,还原糖和氨基酸/蛋白质之间发生一系列复杂的反应,导致棕色/黑色大分子和具有不同气味的中间分子,包括还原的酮、醛和杂环化合物,为食物提供诱人的美味和诱人的颜色。3.还原糖的测定方法:   3,5-它们在植物中的分布不仅反映了碳水化合物在植物中的运转,而且是呼吸的基质。还原糖也可以形成其他物质,如有机酸。此外,水果和蔬菜中的糖含量也是增强其品质的一个重要指标。还原糖在生物体的新陈代谢中起着重要的作用。其他碳水化合物,如淀粉和蔗糖,水解后也会产生还原糖。通过本实验,我们掌握了还原糖定量测定的基本原理,实践了比色测糖法的基本操作,并使用了测温仪分光光度计。实验原理:   1.还原糖还原糖是还原糖的总称。含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖具有还原性。如葡甘露聚糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等。   2.美拉德反应美拉德反应广泛分布于食品工业中的非酶褐变反应:   当加热时,还原糖和氨基酸/蛋白质之间发生一系列复杂的反应,导致棕色/黑色大分子和具有不同气味的中间分子,包括还原的酮、醛和杂环化合物,为食物提供诱人的美味和诱人的颜色。3.还原糖的测定方法:   3,5:吸光度I0:入射光强度I:   透射光强t:   透射率(透射率)k:   比例常数l:   溶液厚度测试仪器、试剂和材料:   1.实验仪器:   紫外可见分光光度计2。实验试剂:   (1)1.0毫克/毫升标准葡萄糖(2)3,5-入射光强度1:   透射光强t:   透射率(透射率)k:   比例常数l:   溶液厚度测试仪器、试剂和材料:   1.实验仪器:   紫外可见分光光度计2。实验试剂:   (1)1.0毫克/毫升标准葡萄糖(2)3,5:市售面粉。实验步骤:1。提取还原糖准确称取0.20克面粉,加入蒸馏水约3毫升,在研钵中研磨成匀浆。转移到烧瓶中,用约30毫升蒸馏水冲洗研钵2~3次,洗脱液也转移到烧瓶中。将温度保持在50℃的恒温水浴中20分钟,并不时搅拌以浸出还原糖。将浸提夜(包括沉淀物)转移到100毫升离心管中,以4000转/分钟的速度离心5分钟,沉淀物用20毫升蒸馏水洗涤一次,再次离心,合并两个离心机的上清液,用蒸馏水定容至100毫升,混合均匀作为待测还原糖液。还原糖的测定取1毫升。2.总糖水解准确称取0.50克面粉,加入蒸馏水3毫升,在研钵中研磨成匀浆,转移至烧瓶中,用12毫升蒸馏水冲洗研钵2~3次,将洗脱液转移至烧瓶中。向烧瓶中加入6摩尔/升盐酸10毫升,搅拌均匀,在沸水浴中水解0.5小时,取出1~2滴,置于白瓷板上,加入1滴I2-1。提取还原糖准确称取0.20克面粉,加入蒸馏水约3毫升,在研钵中研磨成匀浆。转移到烧瓶中,用约30毫升蒸馏水冲洗研钵2~3次,洗脱液也转移到烧瓶中。将温度保持在50℃的恒温水浴中20分钟,并不时搅拌以浸出还原糖。将浸提夜(包括沉淀物)转移到100毫升离心管中,以4000转/分钟的速度离心5分钟,沉淀物用20毫升蒸馏水洗涤一次,再次离心,合并两个离心机的上清液,用蒸馏水定容至100毫升,混合均匀作为待测还原糖液。还原糖的测定取1毫升。2.总糖水解准确称取0.50克面粉,加入蒸馏水3毫升,在研钵中研磨成匀浆,转移至烧瓶中,用12毫升蒸馏水冲洗研钵2~3次,将洗脱液转移至烧瓶中。向烧瓶中加入6摩尔/升盐酸10毫升,搅拌均匀,在沸水浴中水解0.5小时,取出1~2滴,放在白瓷板上,加入1滴I2: 1。还原糖提取粉的质量:m1=0.20g克II。总糖提取面粉的质量:   m2=0.50g6M盐酸;   6M氢氧化钠(张茜配置)三。样品的测准葡萄糖/ml00.10.20.30.40.51.0ml还原糖提取物0.5ml总糖水解产物蒸馏水/ml 1.00.90.80.70.60.500.5DNS试剂/mL 2.02.02.02.02.02.02.0蒸馏水/mL 4 . 04 . 04 . 04 . 04

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