一种用于常温快速检测新型冠状病毒的扩增体系及其应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112779354 A (43)申请公布日 2021.05.11 (21)申请号 202110014379.1 C12N 15/11 (2006.01) C12R 1/93 (2006.01) (22)申请日 2021.01.06 (71)申请人 常州市疾病预防控制中心 地址 213022 江苏省常州市新北区泰山路 203号 申请人 南京恩赛斯生物技术有限公司 (72)发明人 屠博文　黎俊宏　赵莹　陈聪　 徐岩　江锦宜　 (74)专利代理机构 长沙惟盛赟鼎知识产权代理 事务所(普通合伙) 43228 代理人 黄敏华 (51)Int.Cl. C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/6844 (2018.01) C12Q 1/6804 (2018.01) 权利要求书1页 说明书16页 附图3页 (54)发明名称 一种用于常温快速检测新型冠状病毒的扩 增体系及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于常温快速检测新型 冠状病毒的扩增体系及其应用，属于生物技术领 域。本发明以新型冠状病毒中S基因的全部序列 为检测靶点，通过RPA扩增技术，筛选出了特异性 的引物对和探针组合，提高了新型冠状病毒的检 测便捷性和特异性，极大缩短了检测时间。本发 明还提供了一种利用上述引物对和探针进行的 扩增体系的检测方法，该方法检测灵敏度高，检 出限低，耗时短。本发明提供的方法的反应温度 为35～42℃，对温度要求不高，能适用于现场及 野外测试。 A 4 5 3 9 7 7 2 1 1 N C CN 112779354 A 权　利　要　求　书 1/1 页 1.一种用于常温快速检测新型冠状病毒的引物对，其特征在于，所述引物对包括上游 引物和下游引物；所述上游引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO：1、SEQ  ID NO：4所示，所述下游 引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO：2、SEQ  ID NO：5所示。 2.根据权利要求1所述的一种用于常温快速检测新型冠状病毒的引物对，其特征在于， 所述引物对为SEQ  ID NO：1/SEQ  ID NO：2或SEQ  ID NO：4/SEQ  ID NO：5。 3.一种用于常温快速检测新型冠状病毒的探针，其特征在于，所述探针长度为46～ 52bp，5′端有带抗原标记的寡核苷酸作为标签；3′端有阻断基团；所述探针中部设计有一个 四氢呋喃替代的脱碱基位点THF，所述位点THF距离3′端至少有15bp，距离5′端至少有30bp。 4.根据权利要求3所述的一种用于常温快速检测新型冠状病毒的探针，其特征在于，所 述带抗原标记的寡核苷酸为FAM基团；所述阻断基团为为C3 spacer。 5.根据权利要求4所述的一种用于常温快速检测新型冠状病毒的探针，其特征在于，所 述探针的核苷酸序列如SEQ  ID NO：3、SEQ  ID NO：6所示。 6.权利要求1～2任一项所述的用于常温快速检测新型冠状病毒的引物对和权利要求3 ～5任一项所述的用于常温快速检测新型冠状病毒的探针在检测新型冠状病毒中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述引物对为SEQ  ID NO：1/SEQ  ID NO：2， 所述探针为SEQ  ID NO：3；或者所述引物对为SEQ  ID NO：4/SEQ  ID NO：5，所述探针为SEQ