检测冠状病毒抗体的试剂盒、冠状病毒抗体的检测方法发明专利.docxVIP

检测冠状病毒抗体的试剂盒、冠状病毒抗体的检测方法 技术领域 本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种检测冠状病毒抗体的试剂盒，冠状病毒疫苗原液以及抗人IgG抗体或其活性功能片段在制备检测冠状病毒抗体检测试剂中的用途，以及一种冠状病毒抗体的检测方法。 背景技术 冠状病毒(Coronavirus)是自然界广泛存在的一大类病毒，是直径约80～120nm的RNA病毒。目前已发现有七种可感染人类的冠状病毒，分别是人冠状病毒229E(HCoV-229E)、HCoV-OC43、SARS病毒(SARS-CoV)、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS病毒(MERS-CoV)以及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)。 新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的急性呼吸道传染病，在全球各国大规模爆发并急速扩散，目前已成为全球性重大的公共卫生事件，并成为人类历史上致死人数最多的流行病之一。 新型冠状病毒包含四种主要的结构蛋白：刺突(Spike，S)蛋白、膜(Membrane，M)蛋白、包膜(Envelope，E)蛋白和核衣壳(Nucleocapsid，N)蛋白。S蛋白是位于病毒囊膜表面的同源三聚体蛋白，由N端的S1亚基和C端的S2亚基组成。SARS-CoV-2通过位于S1亚基中的受体结合结构域(Receptor Binding Domain，RBD)识别和结合宿主细胞表面的血管紧张素转化酶2(Angiotensin-converting Enzyme 2，ACE2)，触发细胞膜融合级联反应，从而进入细胞造成感染。 面对肆虐的新冠疫情，新型冠状病毒疫苗被认为是新型冠状病毒的首选防护手段。已批准使用的疫苗III期临床试验中，尽管接种疫苗的受试者有一定的感染率，但相对于安慰剂组，已经证明了疫苗对疾病的保护力。同时，疫苗临床及相关研究数据显示，中和抗体在防止(或减轻)新型冠状病毒感染中起着重要的作用，因此对于中和抗体的检测也至关重要。中和抗体检测的实验室“金标准”是感染抑制试验，主要包括蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test，PRNT)和微量中和试验(Micro-neutralization assay，MNA)。对于新冠中和抗体的检测，两种方法均将定量SARS-CoV-2病毒与不同稀释度的待测样本混合后，接种到单层Vero细胞上。通过细胞的病毒变程度，建立抑制曲线，评估样本中中和抗体的滴度。两种方法中均涉及SARS-CoV-2活病毒，对试验环境的生物安全等级要求高。 发明内容 本发明目的在于提供一种检测冠状病毒抗体的试剂盒，以及一种冠状病毒抗体的检测方法，旨在解决现有冠状病毒抗体检测技术中存在的对生物安全级别要求高、操作复杂、检测通量低的技术问题。 为了实现上述发明目的，本发明一方面，提供了一种检测冠状病毒抗体的试剂盒，其包括冠状病毒疫苗原液以及抗人IgG抗体或其活性功能片段。 本发明提供的试剂盒，利用冠状病毒疫苗原液以及抗人IgG抗体或其活性功能片段作为试剂盒组分，从而实现对冠状病毒抗体的检测，具有操作简便、特异性高、检测通量高的优点，可满足大规模检测的需求。 本发明另一方面，提供了冠状病毒疫苗原液以及抗人IgG抗体或其活性功能片段在制备检测冠状病毒抗体检测试剂中的用途。 本发明利用抗人IgG抗体或其活性功能片段可以结合冠状病毒疫苗原液与冠状病毒抗体的结合物的特性，从而实现对样本中冠状病毒抗体的检测。该试剂盒可以实现对冠状病毒抗体的定量检测，且检测过程无需在BSL-3实验室进行即可快速获得检测结果，具有操作简便、特异性高、检测通量高的优点。 本发明最后一方面，提供了一种冠状病毒抗体的检测方法，其包括如下步骤： 提供待测样本、冠状病毒疫苗原液、抗人IgG抗体或其活性功能片段、固相载体和发光底物，其中，所述抗人IgG抗体或其活性功能片段标记有信号标记物； 将所述待测样本、所述冠状病毒疫苗原液和所述固相载体进行混合处理，得到第一结合物； 将所述第一结合物与所述抗人IgG抗体或其活性功能片段进行混合处理，得到第二结合物； 将所述第二结合物与所述发光底物进行混合反应，测量所述混合反应产生的光子数，所述光子数与所述待测样本中冠状病毒中和抗体的含量成正比。 本发明提供的冠状病毒抗体检测方法利用间接法检测原理，以冠状病毒疫苗原液作为固相抗原，通过结合待测样本中的冠状病毒抗体后形成第一结合物，再与标记有信号标记物的抗人IgG结合或其活性功能片段形成第二结合物用于发光检测。该检测方法可以快速检测待测样本中的冠状病毒抗体，具有操作简便、特异性高、检测通量高的优点，可满足大规模检测的需求。 附图说明 图1表示实施例提供的试剂