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仪器分析高效液相色谱法 第一页，共41页 * 第二页，共41页 * 凝胶柱上加上中药提取物 第三页，共41页 * 洗脱的效果 第四页，共41页 * HPLC基本组成示意图 HPLC主要由色谱柱、加压泵和检测器组成 第五页，共41页 * 色谱柱 色谱柱是液相分离的核心部件 第六页，共41页 * 输液泵 输液泵分单元等度泵和多元梯度泵 第七页，共41页 * 检测器 对没有紫外吸收的物质的检测，以蒸发光散射检测器用得较多 检测器种类很多，现在最常用的是紫外检测器 第八页，共41页 * 进样器— 手动进样器 Rheodyne 7725i 几乎成了所有液相色谱仪的进样器 第九页，共41页 * 进样器— 手动进样器—六通阀 第十页，共41页 * 进样器 自动进样器可由软件完全控制 Waters 717 Agilent 第十一页，共41页 * 色谱工作站 色谱工作站就是HPLC的控制系统 外企的在数万元左右，国产的几千元。 第十二页，共41页 * 色谱工作站 工作站的两大功能 1.控制仪器 2.处理数据 第十三页，共41页 * 液相色谱仪器常见种类 high performance liquid chromatograph 第十四页，共41页 * 液相色谱仪（2） 第十五页，共41页 * 液相色谱仪（3） 安捷伦Agilent 1100 第十六页，共41页 * 液相色谱仪（4） 第十七页，共41页 * 液相色谱仪（5） 上海伍丰科学仪器有限公司 第十八页，共41页 * 液相色谱仪（6） 戴安公司Ultimate 3000 第十九页，共41页 * 高效液相色谱法的特点 特点：高压、高效、高速 现代药物分析最有用的工具和方法 第二十页，共41页 * 高效液相色谱法在药典中的使用 1985年版 1990年版 1995年版 2000年版 2005年版 数量 8 56 121 279 1327 比例% 0.5 3.2 5.1 10.4 41.3 第二十一页，共41页 * 高效液相图谱 各成分依次流出色谱柱，从进样到出峰的时间称为保留时间 第二十二页，共41页 * 定性方法 定性: 确定成分归属，依据与对照品相比较时，相同的保留时间 第二十三页，共41页 * 定量方法 外标法 内标法 归一法 第二十四页，共41页 * 定量方法——外标法 第二十五页，共41页 内标法 对照溶液：精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。 供试品溶液：再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图。 第二十六页，共41页 * 定量方法——内标法 对照品 供试品 内标物 第二十七页，共41页 * 定量方法——归一法 第二十八页，共41页 * （1）吸附色谱法 （2）正相色谱法 （3）反相色谱法 ①一般反相色谱法 ②反相离子对色谱 ③反相离子抑制色谱 主要分离方法 第二十九页，共41页
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