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一些固定剂的配方及性能介绍 固定,就是用某种方法以最快的速度将细胞杀死并保持组织 及细胞原有的形态结构及其组成。固定在组织制片中极为重要, 因为机体死后血液循环停止,细胞逐渐死亡,如不立即处理,则 细胞内的酶(水解酶)会使蛋白质分解为氨基酸渗出细胞,使细 胞溶解破坏,组织变形,在无冰藏的条件下,更可因其病原微生 物的迅速繁殖而腐败,组织结构破坏,不利于形态学的诊断。 组织固定的目的为 1、迅速防止组织、细胞死后变化,防止自 溶与腐败,以保持和细胞与正常生活时的形态相似; 2、使细胞内 的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶解物质,以保持 它原有的结构与生活时相仿; 3、使组织中的各种物质沉淀和凝固 起来而产生不同的折光率,造成光学上的差异,以便染色后易于 鉴别和观察; 4 、固定剂兼有硬化作用,使组织硬化,增加组织硬 度,便于制片; 5、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有的形态 结构;经过固定的组织,能对染料产生不同的亲和力而着色清晰, 便于辨认。为了能够达到固定的目的,固定剂必须具备以下的性 质和条件: 1、迅速渗入组织而固定原生质,使短期解剖的组织细 胞形态不至于有较大变化; 2、固定液有相当的渗透力,对组织各 部分的渗透力相等,可使组织内外完全固定; 3、使组织细胞中不 至于因固定引起人为的改变; 4、在凝固原生质以后,增加细胞对 于各种穿透的抵抗力,不至于因以后的处理,而使固定后的原生 质变形; 5、尽可能避免使组织膨胀或收缩(不致改变原生质原来 的体积); 6、能使细胞内的成分(蛋白质)凝固或沉淀下来; 7、 增加细胞内含物的折光度,易于鉴别,增加媒染作用和染色作用; 8、使细胞变硬,适于切片,但又不使材料太坚硬或松脆; 9、使 [1][2] 组织充分固定,便于保存。 下面我们介绍中华医学会病理分会推荐的几种常用固定剂的 性能 [3] : 1、 4%中性甲醛( 10%中性福尔马林)固定液 配方:甲醛( 40%)100ml,无水磷酸氢二钠 6.5g ,磷酸二氢 钠 4.0g ,蒸馏水 900ml。 福尔马林不能使蛋白质及核蛋白凝固,但能保存脂类,可用 于高尔基体、线粒体的固定,是糖的保护剂。对大多数抗原物质 保存较好,对细胞膜的通透性有影响,可能使某些大分子抗原失 去活性。福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩较少。 2、乙醇 - 甲醛(酒精 - 福尔马林, AF)固定液 配方:甲醛( 40%)100ml,95%乙醇 900ml。 酒精可以凝固蛋白质,但不能沉淀核蛋白,能溶解大部分脂 类。酒精渗透速度快,胶水性强。除了固定作用外,还具有硬化 和脱水作用。缺点是渗透力差,能使组织收缩,易挥发,容易吸 收空气中的水分。酒精是一种还原剂,能被氧化成醋酸,不能与 铬酸、锇酸及重铬酸钾等氧化剂配合成固定剂。 AF 液兼有脱水作用,对皮下组织中肥大细胞固定好。 3、Carnoy 固定液 配方:无水乙醇 60ml,氯仿 30ml,冰醋酸 10ml。 醋酸,又称乙酸、冰醋酸。固定组织常用 5%的溶液,能沉淀 核蛋白,不能沉淀白蛋白、球蛋白,不能保存糖,也不能固定脂 质,可使染色体保存较好。其穿透力强,渗透

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