构建抗除草剂工程植物机理(1)提升除草剂作用靶酶剂量 EPSP合成酶生理作用与草甘膦抑制作用 EPSP合成酶: 5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶 EPSP合成酶是芳香族氨基酸——色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸生物合成过程中关键酶, 芳香族氨基酸参与植物体内部分生物碱、香豆素、类黄酮、木质素、酚类物质等次生代谢。 EPSP 芳香族氨基酸 关键物质次生代谢 草甘膦施用后被植物快速吸收, 并随同化产物传导至整个植株, 因其阻断了芳香族氨基酸生物合成, 对植物细胞分裂、叶绿素合成、蒸腾、呼吸以及蛋白质等代谢过程产生影响而造成植物死亡(竞争抑制, 非选择性)。 植物5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶cDNA克隆 连接CaMV开启子, 经过Ti质粒载体导入矮牵牛 现在已将这种修饰过基因导入烟草和矮牵牛, 并产生了抗性(竞争抑制, 非选择性) 构建抗除草剂工程植物机理(2)引入除草剂钝化酶 谷氨酰胺合成酶(GS)及其抑制剂膦丝菌素 GS生理功效及酶学特征 谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase(GS), 催化无机氮向有机氮转化反应, 植物体中GS是将氨固定到有机物当中。 膦丝菌素( PPT )抑制机理 无机氮 GS 有机氮 PPT-CoA Bar 从链霉菌中克隆编码使膦丝菌素乙酰化而失活酶基因 连接CaMV开启子, 并将其转
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