流式微珠阵列法检测IFNγ诱导的Jurkat细胞Th1Th2细胞因子表达.docVIP

流式微珠阵列法检测IFNγ诱导的Jurkat细胞Th1Th2细胞因子表达 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：流式微珠阵列法检测IFNγ诱导的Jurkat细胞Th1Th2细胞因子表达 1 文2：不明原因习惯性流产患者Th1Th2细胞亚群的研究 6 1 材料和方法 6 2 结果 7 3 讨论 7 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 流式微珠阵列法检测IFNγ诱导的Jurkat细胞Th1Th2细胞因子表达 文1：流式微珠阵列法检测IFNγ诱导的Jurkat细胞Th1Th2细胞因子表达 Detection of Expression of Th1/Th2 Cytokines in Jurkat cell Treated with γ-Interferon by Cytometric Bead Array Abstract In order to explore the value of γ-interferon (IFN-γ) in therapy of T lymphoid leukemia and role of cytometric bead array (CBA) method in detection of Th1/Th2 cytokines expression，the Jurkat cells were cultured for 48 hou in different concentration of IFN-γ，the expressio of IL-2，IL-6，INF-γ and TNF-α in culture supernatants were assayed by CBA method; CD25 expression was assayed by flow results showed that the expressio of IL-2，TNF-α were enhanced in INF-γ dose-dependent way，and the expression of CD25 was also enhanced，but there was no expression of IL-6. It is concluded that Jurkat cells induced by IFN-γ were able to express high-level of Th1 cytokine and IL-2 membrane receptor (CD25)，and the CBA method can be used to exactly evaluate the dynamic change of Th1/Th2 cytokines. Key words cytometric bead array; Th1/Th2 cytokine; IFN－γ; T lymphoid leukemia 流式微珠阵列（cytometric bead array，CBA）是近年来 发展 起来的新技术，可在一份标本中同时检测多达10种细胞因子（IFN-γ、TNF-α、TNF-β、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10），具有快速、简便、准确的特点，而且灵敏度高（可达 pg/ml），可以准确反映Th1/Th2平衡状态［1-4］。有学者认为，IFN-γ可应用于T淋巴细胞白血病治疗，但目前为止并无确凿的实验证据。Jurkat细胞株为T淋巴瘤研究常用模型，因此本研究组以流式微珠阵列法检测IFN-γ诱导的Jurkat细胞Th1/Th2细胞因子表达，同时检测mIL-2R（IL-2膜上受体，CD25）表达，探讨IFN-γ的抗肿瘤效应及作用机制。 材料和方法 材料 RPMI 1640液体培养基（杭州科达生物公司产品），临用前加入15%小牛血清（杭州四季青生物工程公司产品）； Jurkat 细胞株（ 中国 科学 院上海细胞生物学研究所提供）； IFN-γ（上海克隆生物高技术有限公司生产）； 流式微珠阵列细胞因子检测试剂盒（Bender Medsystems产品，Austria）；CD25 FITC单克隆抗体（美国Becton Dickion公司产品） 细胞培养 以含15%灭活小牛血清的完全RPMI 1640培养液，于37℃、5% CO2、饱和湿度下培养Jurkat细胞，每2-3天换液，取对数生长期的细胞进行实验。 给药处理 IFN-γ以完全RPMI 1640培养液配成1×106 U/ml 贮存液，4℃避光保存。以1×106/ml浓度接种对数生长期细胞于6孔板中，培养6小时后