实验6肝糖原的提取与鉴定.docVIP

实验6 肝糖原的提取与鉴定 一、原理 肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一。储存量虽不多，但在代谢过程中，它是维持血糖平衡及体内糖的重要来源之一。其合成或分解，对血糖浓度的调节起着重要的作用。 糖原是一高分子化合物(分子量约为400万)。微溶于水，无还原性，与碘作用生成红色。提取糖原时，将新鲜的肝组织与石英砂及三氯醋酸共同研磨。这样当肝组织被充分破碎后，其中的蛋白质会被三氯醋酸所沉淀。而糖原仍留于溶液中。当过滤除去沉淀后，滤液中的肝糖原可通过加入乙醇而沉淀下来，将沉淀的糖原溶于水，一部分做碘的颜色反应，一部分经酸水解成葡萄糖后，用斑氏(Benedict)试剂检验。 二、 试剂及器材 、 (1) 10％(w/v)三氯醋酸溶液：称取三氯醋酸l0g，用蒸馏水溶解后稀释到l00mL。 (2) 5％(w/v)三氯醋酸溶液：称取三氯醋酸5g，用蒸馏水溶解后稀释到100mL。 (3) 95％(v/v)乙醇：量取无水乙醇95ml，加蒸馏水稀释到100ml。 (4) 浓盐酸(HCl密度1.19)。 (5) 20％(w/v)NaOH溶液：称取NaOH 20g，用蒸馏水溶解后稀释到100mL。 (6) 碘液：称取碘1g、碘化钾2g，用500mL蒸馏水溶解即成。 (7) 斑氏试剂：将硫酸铜17．3g溶于100mL温