冠心病痰瘀证候与Ｅ选择素Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究医学.docVIP

冠心病痰瘀证候与Ｅ选择素Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：冠心病痰瘀证候与Ｅ选择素Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究医学 2 1研究对象 2 2研究方法 3 1、2为GT基因型，3、4、5、6、7为GG基因型，8为 6 1为PCR产物，2、3、5、7为SS基因型，4、6为 6 文2：冠心病基因多态性的研究进展 9 1 血脂代谢因子的基因多态性 10 2 RAS系统基因多态性 10 3 凝血及纤溶系统基因多态性 11 4 炎症细胞因子相关基因多态性 12 5 讨论 12 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 冠心病痰瘀证候与Ｅ选择素Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究医学 文1：冠心病痰瘀证候与Ｅ选择素Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究医学 冠心病是严重影响人类健康生活的疾病之一，炎症在冠心病的形成 发展 过程中起着重要作用。遗传流行病学研究显示冠心病的发病有遗传因素的作用，目前相继发现一些基因多态性影响脂质代谢、炎症反应、血栓形成及血管收缩与舒张等病理生理过程，与冠心病发生的危险性增加关系密切。痰瘀证候是冠心病的常见证候。本研究采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法（ＰＣＲＲＦＬＰ）检测冠心病痰瘀证候患者的血清Ｅ选择素（Eselectin）Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因型，以期发现其中的内在联系。现将结果报道如下。 1研究对象 11资料来源研究对象均来源于２００６年２月～２００７年３月在广州中医药大学第一附属 医院 心内科临床确诊为冠心病心绞痛和急性心肌梗死的住院病例（部分病例经冠状动脉造影明确诊断）；同时设立正常组作为对照（正常组为健康志愿者）。所有研究对象均为汉族广东省常住人口。 12诊断标准诊断标准参照１９７９年国际心脏病学会及世界卫生组织关于缺血性心脏病的诊断［１］；辨证标准参照中华人民共和国中医药行业标准（１９９４年）《中医病证诊断疗效标准》［２］中的胸痹心痛辨证分型及沈绍功等［３］《中医心病诊断疗效标准与用药规范》。具体中医辨证标准如下：（１）痰浊证组：胸脘闷痛痞满，口黏乏味，纳呆脘胀，苔腻或黄或白滑，脉滑或数。（２）血瘀证组：胸脘刺痛固定，面晦唇青，怔忡不宁，舌质紫暗或见紫斑或舌下脉络紫胀，脉涩或结代。（３）痰瘀证组：胸痛（心前区痛或痛引肩背）或胸脘痞满，舌质紫暗，或有瘀点、瘀斑，舌苔厚腻，脉弦或滑。同时具备以上四大主症者可辨证为痰瘀证。 13一般资料入选研究对象共１０７例，其中正常组２０例，男６例，女１４例，平均年龄为（６４１５±１２２２）岁，体质量指数为（２３７６±２９１）kg/m2。冠心病组８７例，其中痰瘀证组５５例，男３８例，女１７例，平均年龄为（６４８７±１２９１）岁，体质量指数为（２４６８±３３３）kg/m2；血瘀证组２０例，男１１例，女９例，平均年龄为（６３３０±１０２６）岁，体质量指数为（２４９４±２５４）kg/m2；痰浊证组１２例，男８例，女４例，平均年龄为（５４７５±１１８６）岁，体质量指数为（２４１８±２８０）kg/m2。各组在年龄、性别、体质量指数方面比较差异无显著性意义（Ｐ＞００５）,具有可比性。 2研究方法 21标本收集选择血清／全血作为观察样本，病人入院后次日凌晨６时进行采血，标本放置于冰箱，并于当日对所需血清标本进行以3000min离心10min，取上清液，置于-３０℃冰箱保存，全血标本置于-７０℃冰箱保存。 22检测指标及方法Eselectin浓度采用酶联免疫吸附法测定（试剂盒由美国RD公司提供），由本院实验中心完成；采用聚合酶链反应—限制片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）基因分析法检测Eselectin　Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因型，由中山大学组织配型中心完成。血清Eselectin酶联免疫法测定具体操作方法：（１）血清标本置于室温下解冻；（２）按说明准备试剂、标准品及样本；（３）每孔加入100μL测定稀释液；（４）每孔加入１００μL标准品或已稀释的样本。室温下在振荡机上以（５００±５０）min进行振荡，孵育15h；（５）抽吸清洗６次，将微孔在吸水纸上扣干；（６）每孔加入１００μL酶联物，室温下振荡孵育３０min；（７）每孔加入１００μL显色液，室温避光孵育1h；（８）每孔加入５０μL终止液，３０min内在４５0nm处读Ｄ值；（９）以Ｄ值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清样品的Ｄ值可在标准曲线上查出其浓度。Ｇ９８Ｔ及Ｓ１２８Ｒ基因多态性的关系研究Eselectin　Ｇ９８Ｔ及