外源化学物的特殊毒性.pptVIP

致畸试验 致畸作用(teratogenicity)系在外源化学物对胚胎或胎儿发育过程的干扰作用下，造成胎儿在出生时，某种器官表现形态结构异常的过程。 能诱发致畸作用的外源化学物称致畸物或致畸剂(teratogen)。 第二十三页，共38页 一、动物致畸试验 （一）基本原理： 妊娠母体接触某些具有致畸作用的化学物质，对于处在器官形成期的胚胎发育可产生不良影响，使胎仔形态结构发生缺陷而呈现畸形。因此，可以通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种化学物质有无致畸作用。 第二十四页，共38页 （二）基本方法 1. 动物选择 2.动物交配处理 3. 剂量分组 4. 孕鼠状况观察 5. 动物剖检 6. 胎仔检查 第二十五页，共38页 1. 动物选择 原则上应选择动物体内代谢途径与人类似，胎盘结构也基本与人相近，妊娠期短而一致，产仔数多，而且自发畸形率较低的实验动物，为此多选用大鼠或小鼠。 大鼠首选原因： 对外源化学物代谢过程基本与人相似。 受孕率高，产仔多。 胎仔大小适中，易于观察。 第二十六页，共38页 2.动物交配处理 健康成年未曾孕产的大鼠，体重200~250g，小鼠20~25g。雌雄动物2:1比例于晚上合笼，次日早晨对雌鼠阴道涂片检查，查见精子或发现阴栓者揭示已交配过，定为孕鼠，以这一天作为妊娠第0天计算妊娠日数。将查出的孕鼠按随机区组法分组，每组10~20只。 第二十七页，共38页 外源化学物的特殊毒性 第一页，共38页 第一节 生殖毒性及评价方法 要求： 1、掌握生殖发育毒性的基本概念 2、熟悉生殖发育毒性的评价方法 3、能完成常规生殖发育毒性试验的设计 第二页，共38页 概述 繁殖过程: 生 殖 细 胞 (配子) 精 子 卵 细 胞 发 生 卵 细 胞 受 精 卵 细 胞 着 床 胚 胎 形 成 胚 胎 发 育 器 官 发 生 分 娩 哺 乳 胎 仔 发 育 生殖毒理学 发育毒理学 幼仔 发育 第三页，共38页 一、生殖毒性(reproductive toxicity) 生殖毒性指对雄性和雌性生殖功能或能力的损害和对后代的有害影响。生殖毒性既可发生于妊娠期，也可发生于妊前期和哺乳期。表现为外源化学物对生殖过程的影响，例如生殖器官及内分泌系统的变化，对性周期和性行为的影响，以及对生育力和妊娠结局的影响等。 第四页，共38页 二、发育毒性(developmental toxicity) 发育毒性指在到达成体之前诱发的任何有害影响，包括在胚期(embryonic period)和胎期(fetal period)诱发或显示的影响，以及在出生后诱发和显示的影响。发育毒性的主要表现为： 1. 发育生物体死亡(death of the developing organism) 2. 生长改变(altered growth) 3. 功能缺陷(functional deficiency) 4. 结构异常(structural abnormality) 第五页，共38页 雄性生殖毒性 一、雄性生殖细胞的发生过程 第六页，共38页 二、外源化学物的雄性生殖毒性 （一）对睾丸生精细胞的影响 睾丸 曲细 精管 生殖细胞 支持细胞 精原细胞 精母细胞 精细胞 提供营养、保护、支持 第七页，共38页 (二)对内分泌功能的影响 下丘脑 垂体 睾丸 促性腺激素释放激素 GnRH 促性腺激素 雄性 激素 促卵泡素 FSH 黄体生成素 LH (三)对性功能和生殖功能的影响 第八页，共38页 三、雄性生殖毒性的检测方法 （一）精子分析 (1)精子计数：是雄性性功能的一项重要指标，可提供有关精子发育与成熟方面的粗略信息 。 (2)精子形态观察：精子头和尾的形态学改变可影响精子运动和穿透卵细胞的能力。 (3) 精子状态分析试验：包括有精液的pH、液化时间，精子运动能力，蛋白质、脂质和微量元素的含量等。可了解精子所处的微环境及精子运动等情况。 （二）精子穿透实验 精子穿透实验实际上就是精子体外授精的实验。 第九页，共38页 （三）睾丸中标志酶活性检测 一类酶其含量和活性随着精子的形成、成熟而增高，如乳酸脱氢酶同工酶、山梨醇脱氢酶、透明质酸酶、α-磷酸甘油脱氢酶等； 一类则是随着精子的形成、成熟，其活性下降，如6-磷酸葡萄糖