不同龄大鼠胃酸胃内细菌与胃肠道感染的相关研究临床医学.docVIP

不同龄大鼠胃酸胃内细菌与胃肠道感染的相关研究临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：不同龄大鼠胃酸胃内细菌与胃肠道感染的相关研究临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 4 文2：电针调控大鼠胃酸分泌的机制 6 0 引言 8 1 材料和方法 8 2 结果 10 3 讨论 11 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 15 正文 不同龄大鼠胃酸胃内细菌与胃肠道感染的相关研究临床医学 文1：不同龄大鼠胃酸胃内细菌与胃肠道感染的相关研究临床医学 正常人胃液的pH值为～，可以杀死随食物进入胃内的细菌，通常正常人的胃内可以分离出少量细菌，主要是来源于口腔和食物的过路菌，含量一般在103 CFU/ml以下〔1〕 。胃酸状态对细菌在胃内的生存非常重要。目前临床上常用的抑制胃酸的药物包括组胺H2受体阻滞剂及质子泵抑制剂（PPI），其中PPI可使胃内pH值明显增高，这样有可能造成胃内细菌过度生长，而胃内细菌过度生长是否能引起胃肠道的炎症呢？ 本研究从动物实验着手，研究大鼠胃内pH值与胃部细菌数量的关系，并研究衰老对胃酸及胃部细菌的影响，观察胃内细菌的繁殖是否能引起胃肠道的炎症。 1 材料与方法 材料 主要仪器 电热恒温培养箱，重庆四达公司。 电子 天平，上海精天电子仪器厂。Olympus BH2 显微镜，日本Olympus公司。 主要试剂 广泛及精密pH值试纸，北京化工厂。奥美拉唑镁肠溶片MUPS，阿斯利康制药有限公司。一次性血琼脂培养基，天津市金章科技开发有限公司。 方法 实验对象 30只Wistar大鼠（解放军总 医院 动物实验中心提供），其中20只3月龄，体重～ g，随机分2组：非老龄对照组10只，非老龄奥美拉唑组10只；另有老龄组10只，22月龄，体重～ g。组内大鼠雌雄各半。 用药方法 奥美拉唑肠溶片分散于蒸馏水中，浓度为 mg/ml，分散后于30 min内灌胃。非老龄奥美拉唑组以奥美拉唑灌胃，2 ml/100 g体重，每天2次(15 mg·kg-1·d-1)，非老龄对照及老龄组均以等量的生理盐水灌胃。3组的灌胃时间均为2 w。在2 w内观察各组大鼠是否出现腹泻情况。 胃液pH值测定 2 w后，非老龄奥美拉唑组和非老龄对照组、老龄组大鼠均禁食24 h，禁水12 h。之后用10%水合氯醛(约2 ml/kg)腹腔注射麻醉，在严格的无菌条件下剖腹并游离胃，用止血钳夹住贲门和幽门。于前胃区剪一小切口，用无菌注射器抽出约1 ml胃液，用广泛pH试纸及精密pH试纸测出胃液pH值。 留取标本 取前胃及后胃组织各一块，放入已称量好的无菌Eppendorf管中，电子天平称重，置500 μl生理盐水中；另取后胃组织一块，浸泡于4%的甲醛溶液中。 细菌培养 把胃组织在无菌研磨器中研成匀浆，根据不同的胃液pH值取1、10或100 μl组织研磨液接种于普通血平板，在37℃培养箱中需氧培养24 h观察结果。计数细菌的菌落数，细菌计数单位为CFU/g。 病理观察 取出固定于多聚甲醛的胃组织，按常规脱水、石蜡包埋，4 μm切片，HE染色,由有经验的病理科医生在显微镜下观察炎细胞浸润情况。 统计学分析 用统计软件。细菌计数变换为 自然 对数，组间资料t检验、成组资料秩和检验。 2 结 果 胃内pH值变化与细菌过度生长 与非老龄对照组大鼠相比，老龄对照组大鼠胃内pH、胃部细菌数量均无明显差异(P＞)。与非老龄对照组大鼠相比，非老龄奥美拉唑组胃内pH、胃部细菌数量均有明显差异(P＜)。见表1。表1 胃内pH值变化对胃部细菌数量的影响(略) 大鼠胃肠道炎症的观察 3组大鼠在2 w的实验期间均未发生明显的腹泻。观察3组的HE染色片，发现胃组织均无明显淋巴细胞及粒细胞浸润。见图1。 3 讨 论 胃酸正常分泌对维持胃肠道内生态环境的稳定、实现正常生理功能有很重要的作用。胃酸由于生理或病理原因减少，则可发生胃内细菌过度生长。PPI是强力抑制胃酸分泌的药物，因此，可以引起胃内细菌过度生长〔2〕 。 本实验表明，随着大鼠胃内pH值的增加，大鼠胃部的细菌数量也相应增加。FriisHaen等的实验证明，在胃泌素敲除小鼠和应用PPI的小鼠胃中都出现了细菌过度繁殖〔3〕 。DiogoFilho 等给24只Wistar大鼠腹腔内注射奥美拉唑，12只注射盐水，注射PPI组大鼠的胃液和胃组织中细菌数量明显增加〔4〕 。Thore等对47名患消化性溃疡的门诊病人进行4 w的奥美拉唑或西咪替叮 治疗 ，其中25名服用奥美拉唑的病人和8名服用西咪替叮的病人出现了细菌过度生长〔5〕 。李子俊等把40例内镜确诊为消化性溃疡的病人随机分为